酵素修饰果胶之抗氧化乳化安定及癌细胞生长抑制作用.DOCVIP

酵素修飾果膠之抗氧化、乳化安定及癌細胞生長抑制作用 Effect of pectic enzyme treated pectin on the antioxidant capacity, emulsion stability and cancer cell growth inhibition 研究生：黃評脩 Ping-Hsiu Huang 指導教授：吳明昌 博士 Dr. Ming-Chang Wu 王裕泰 博士 Dr. Yuh-Tai Wang 【論文】 在台灣近20 年來惡性腫瘤一直是十大死因之首，目前並無方法能根除癌症細胞使其不再復發、聚集或轉移到其他的組織臟器中。因此，從天然植物中尋求可有效抑制癌症生長、且具安全性之素材，是相當具有實用與學術價值的工作。果膠是存在於柑橘類水果中的天然物質，廣泛存在於果皮與果肉中，柑橘類的水果包括柑橘、檸檬、葡萄柚等，且許多研究指出化學修飾果膠因pH 改變使果膠間的鍵結斷裂成短鏈及不具分支的直鏈半乳糖醛酸，其易溶於水且容易被人體吸收利用，進而抑制癌細胞貼附於宿主細胞表面，抑制癌細胞的轉移。除此之外化學修飾果膠亦具有移除重金屬離子、降血糖、降膽固醇及抑制iNOS、COX-2 等活性預防發炎反應及癌症的形成等生理活性。由於果膠裂解酶、果膠酯酶、聚半乳糖醛酶等亦具有降解和修飾果膠之功效，而且酵素每單位轉換出生成物的速率(turn over number)遠大於化學反應，因此本研究分成以下主題進行研究:(1)將商業果膠酵素與果膠經不同時間反應成酵素修飾果膠後，評估其抗氧化能力，找出最佳之果膠修飾反應條件，並製備成乳化物探討抑制油脂氧化能力之可行性々(2)進行細胞試驗評估，以細胞模式(in vitro)觀察修飾果膠對不同腫瘤細胞活性之抑制效果，並探討其可能之抑癌之機制。在抗氧化能力方面 PET-pectin (分子量:1 kDa、DE 11.6%) 比柑橘果膠 (分子量:353 kDa、DE 60%)具有良好的抗氧化能力 (TEAC總抗氧化力、DPPH清除自由基能力與還原力)，此外，亦可增加大豆分離蛋白O/W乳化物的乳化活性、乳化安定性和氧化安定性。細胞試驗評估方面:PET-pectin可以被BALB/c小鼠和人類腫瘤細胞吸收，並且使細胞膜的通透性增加，達到抑制人肝癌HepG2細胞、人類肺癌A549細胞和人類結腸癌colo205細胞的生長，而人類正常腎臟細胞HEK293的生長則不受到影響。綜合上述，柑橘果膠經果膠酵素水解之產物PET-pectin可以延緩乳化物脂質過氧化，乳化穩定作用，和抗腫瘤活性，可以應用於食品加工的製程上，進而延長食品的保存期限與提升產品的附加價值。因此，柑橘果膠水解產物PET-pectin，未來可以作為一種天然的膳食補充品或食品配方(添加物)，預防人類癌症腫瘤產生。 關鍵字：惡性腫瘤、酵素修飾果膠、抗氧化能力、乳化、生長抑制 【Abstract】 Malignant tumor is the first one of the ten causes of death in the past 20 years in Taiwan. No method was found to eradicate the recurrence, aggregation or metastasis of cancer cells nowadays. Hence, the studies on innocuous components with cancer curing abilities from natural plants are valuable, practical, and academic work. Recently, a natural substance, pectin, of peel and pulp in citrus fruits such as lemon, grapefruit, orange, and tangerine, was reported to be breakdown into shorter unbranched galacturonic acid chain, modified by pH adjustment, namely modified citrus pectin (MCP) that exhibited more soluble and easier absorption by the human body. It can inhibit the adhering of cancer cell on the surface of host cells and then suppress the metastas