实验十三、质粒的转化教案编写 .pptVIP

周三晚;1座 10 20;周四晚;周五;实验十三、质粒的转化;+限制性内切酶;一、背景介绍 ;1.GFP： 绿色荧光蛋白基因 720bp ;;2. Bla：β-内酰胺酶基因 3. AraC: 阿拉伯糖调控基因 ;中心法则;无阿拉伯糖;AraC;二、实验目的 学习感受态细胞的制备 了解质粒DNA转化方法;四、实验材料和用具 大肠杆菌HB101菌株 pGLO质粒DNA 摇床，涂布棒;三、实验原理 1、感受态细胞 具有接受外援DNA分子能力的细胞 ;2、对照平板 细胞中无质粒DNA转入 无Amp青霉素抗性，在LB/Amp的平板上不生长 3、转化1平板 细胞转入质粒DNA 具有Amp青霉素抗性，在LB/Amp的平板上生长 没阿拉伯糖，则GFP基因沉默不表达，无绿色荧光 4、转化2平板 细胞转入质粒DNA 具有Amp青霉素抗性，在LB/Amp的平板上生长 加入阿拉伯糖，则GFP基因被诱导表达，有绿色荧光;五、方法和步骤 感受态细胞的制备 转化实验 对照 转化 感受态细胞 感受态细胞+5ul质粒DNA