革蘭氏染色法.PPT

微生物實驗　李丹昂　編著 微生物實驗　李丹昂　編著 革蘭氏染色法 目的 原理 材料與儀器 步驟與方法 實驗注意事項 實驗結果 目的 革蘭氏染色法為最常使用且最重要的細菌鑑別染色方法，此課程為教導同學了解革蘭氏染色法的原理學習、如何進行革蘭氏染色技術並利用革蘭氏染色方法來鑑別革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌。 原理 革蘭氏染色法為目前微生物鑑別上最常使用之方法，是由19世紀丹麥病理學家Hans Christian Gram (1853 – 1938)在 in 1884所建立。其原理主要是依據細菌的細胞壁結構不同，利用染色之方法將細菌分為革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌兩大類。 染色之步驟可分為初染、媒染、脫色與復染等四大部分。 革蘭氏陽性菌因其細胞壁厚度較厚且具高度交聯化，富含胜聚醣 (peptidoglycan)，及台口酸(teichoic acid)故當初染後進行酒精脫色時，不易將初染的染劑顏色脫去，因此最終染色結果為依然保留初染劑的顏色－藍紫色； 革蘭氏陰性菌因細胞壁較薄、交聯度低且含較多的脂質成分，當進行酒精脫色時，細胞通透性增加，加上酒精溶解脂質的作用，使得初染劑易滲出，而後再經復染劑的染色後，革蘭氏陰性菌最終之結果則呈現復染劑之顏色－粉紅色。(Less peptidoglycan, more phosphate lipid) 材料與儀器 菌種 大腸桿菌(Escherichia c