食品安全与检测技术.pptxVIP

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;霍乱弧菌 是霍乱的病原菌。霍乱是一种烈性传染病,曾在世界上引起7次全球性的大流行,死亡数百万人。 霍乱弧菌 古典生物 El Tor 生物型。 一、生物学性状 (一)形态染色: 1.革兰阴性杆菌,菌体弯曲呈弧状; 2.单鞭毛,运动活泼; 3.有菌毛; 4.无芽孢,不形成荚膜。;(二)培养特征: 1.兼性需氧菌,有氧生长良好。 2.营养要求不高,普通培养基上生长; 3.耐碱不耐酸,在碱性培养基(pH8.8-9.2)上生长良好。 碱性琼脂平板:遍平、光滑、无色菌落; 碱性蛋白胨水: 生长迅速,液体表面形成菌膜,可用于增菌。 (三) 生化反应: 氧化酶(+),分解蔗糖 (四)抵抗力: 弱,对热,干燥,日光,化学消毒剂和酸均很敏感,耐低温,耐碱。湿热55℃,15分钟,100℃,1~2分钟,水中加0.5ppm氯15分钟可被杀死。0.1%高锰酸钾浸泡蔬菜、水果可达到消毒目的。在正常胃酸中仅生存4分钟。;霍乱弧菌(Vibrio cholerae)极其毒素;(二)所致疾病 正常胃酸可杀灭霍乱弧菌,当胃酸分泌缺乏或低下,或入侵的霍乱弧菌数量较多,未被杀灭的弧菌就进入小肠,在碱性肠液内迅速繁殖,并通过粘液对细菌的趋化吸引作用、细菌鞭毛活动及弧菌粘蛋白溶解酶和粘附素等的作用,粘附于小肠粘膜的上皮细胞表面,并在此大量繁殖,产生霍乱肠毒素。 ;霍乱肠毒素→肠细胞膜表面上的受体(由神经节苷脂GM1组成) ↓         B亚单位与受体结合,使毒素分子变构 ↓ A精致单位进入细胞,A1肽链活化 ↓ 激活腺苷环化酶(AC) ↓ 使三磷酸腺苷(ATP)→环磷酸腺苷(cAMP),cAMP↑ ↓ 导致肠粘膜细胞分泌功能大为亢进,重吸收水分障碍 ↓ 使大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻,由于大量脱水和失盐,可发生代谢性酸中毒,血循环衰竭,甚至休克或死亡。;霍乱弧菌(Vibrio cholerae)极其毒素;致病性链球菌;致病性a族链球菌;;二.病源检测;2.病原分离 ? 链球菌在普通培养基上生长不良。推荐用含5%脱纤维羊血的胰酶消化大豆琼脂(TSA)培养基和增菌用的THB肉汤。脓液或咽试子直接接种于血琼脂平板,血??或脑脊液标本应先增菌再划种血平板。 35~37℃培养24小时后观察菌落特征。链球菌在血平板上形成灰白色、透明或不透明、表面光滑、有乳光、直径0.5~0.75mm,圆形突起的小菌落,显微镜下菌呈圆形或卵圆形,直径0.5~1.0μm,链状排列,长短不一,在液体培养基中易形成长链。若培养结果为阴性,则需培养至48小时再观察,可以提高检出率。;3.快速检测方法 ?(1)酶标免疫测定法:可以使用A群链球菌快速诊断试剂盒,以咽试子为检测标本,10分钟内鉴定是否为A群链球菌。 ?(2)聚合酶链反应:通过特异扩增A群链球菌的致热外毒素A,B,C基因(speA、speB、spec)及溶血素O基因(slo),可以区分A群与非A群链球菌和产肠毒素B的金黄色葡萄球菌,另外对slo的特异扩增还可以区分A群链球菌与其他产溶血素的致病菌包括产肺炎链球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、痢疾志贺菌等。该方法特异性好,灵敏度高,检测线能达ng水平。 ? 【1】《畜牧兽医科技信息》2012年 第4期?|?姚立广;INSERT THE TITLE OF YOUR PRESENTATION HERE ;Free PPT Templates - Widescreen(16:9);Click to add title;INSERT THE TITLE OF YOUR PRESENTATION HERE ;Free PPT Templates - Widescreen(16:9);Click to add title

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