生物化学 第3章节 氨基酸文档资料.pptVIP

= Ka1 [Gly ±][H+] [Gly±] Ka2 [H+] 整理得 Ka1·Ka2=[H+]2 两边取对数 pKa1+pKa2=2pH pH= pKa1+pKa2 2 =pI 结论： 氨基酸的等电点相当于该氨基酸的两性离子状态两侧基团pK值之和的一半。 即pI＝1/2（pKa1+pKa2） 侧链上有解离基团的氨基酸的pI如何计算？ （1）首先氨基酸完全质子化； （2）写出其解离方程式： ①先解离α-COOH, 再解离侧链基团上的COOH; ②再解离α-NH3+, 最后解离侧链基团上的NH3+。 （3）标出各解离步骤的pK值，最后以两性离子状态 两侧基团pK值之和的一半计算其等电点。 例如： （1）Glu的pK1(α-COOH)=2.19， pK2(γ- COOH)=4.25，pK3(α- NH3+)=9.67,计算其pI值。 （2）Lys的pK1(α-COOH)=2.18, pK2(α-NH3+)=8.95，pK3(ε- NH3+)=10.53，计算其pI值。 氨基酸等电点的计算 pI= 2 pK′1+pK′2 一氨基一羧基AA的等电点计算： pI= 2 pK′1+pK′R 一氨基二羧基AA的等电点计算： pI= 2 pK′2+pK′R 二氨基一羧基AA的等电点计算： 可见，氨基酸的pI值等于该氨基酸的两性离子状态 两侧的基团pK′值之和的二分之一。 等电点的应用： 1.氨基酸在等电点时溶解度最小。 2.利用不同氨基酸等电点不同，可利用电泳的方式分离氨基酸。 氨基酸的化学反应 （一）由氨基参加的反应 （二）由羧基参加的反应( 自学 ) （三）由氨基和羧基共同参加的反应 （四）由侧链R基团产生的反应 (一)由氨基参加的反应 1. 与HNO2的反应 2. 酰基化和羟基化反应 3.形成西佛碱反应(自学) 4.脱氨基反应(自学) 1. 与HNO2的反应 R-CH-COOH +HNO2 NH2 R-CH-COOH +N2 +H2O OH 这是Van Slyke氏氨基氮测定法的原理 2.酰基化和羟基化反应 氨基酸氨基的一个H可被酰基或烃基（包括环烃及其衍生物）取代，这些取代基对氨基酸的氨基有保护作用。 R-CH-COOH +R′X NH2 R-CH-COOH +HX NHR′ R′=酰基或烃基 X=卤素（Cl, F） （1）酰基化试剂在多肽和蛋白质的人工合成中被用 作氨基的保护试剂。 酰化试剂：苄氧酰氯、叔丁氧甲酰氯、对-甲苯磺酰氯、 邻苯二甲酸酐 ★丹磺酰氯（DNS-cl，5—二甲基氨基萘-1-磺酰氯）常用于多肽链—NH2末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定。 N Gly—Ala—Ser—Leu—Phe C→→ DNS—Gly—Ala—Ser—Leu—Phe C 水解 DNS—Gly、 Ala、 Ser、 Leu、 Phe DNS-AA在紫外光激发后发黄色荧光。 * 参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双键系统，在紫外光区显示特征的吸收谱带，最大光吸收（?max）分别为280、275、和257nm。由于大多数蛋白质都含有这些氨基酸残基，因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。 * 记忆方法：甲携（缬）来（赖）一（异）本（苯）亮色书（苏） 第3章 氨基酸 氨基酸－蛋白质的构件分子 （一）蛋白质的水解 氨基酸 蛋白质 肽 加酸、 加碱、 加酶 氨基酸是蛋白质的基本组成单位 根据水解程度 ?完全水解 氨基酸混合物 ?不完全水解 大小不等的肽和氨基酸 蛋白质的基本结构单位──氨基酸 一、 氨基酸的结构通式 二、二十种常见的蛋白质氨基酸分类、结构 及三字符号 三、氨基酸的性质 四、氨基酸混合物的分析分离 一、 α－氨基酸的一般结构 ① 与羧基相邻的α-碳原子上都有一个氨基，所以称为α-氨基酸（脯氨酸除外）。 ②只有连在α-碳原子上的R基团是可变的，即各种氨基酸的区别就在于R基的不同。 除R为H(即Gly)外，其余氨基酸的α-碳原子都为不对称碳原子（具有旋光性）。 α-碳原子上带有酸性的羧基和一个碱性的氨基，在一定条件下都可解离，是两性电离。 氨基酸结构通式 二、氨基酸的分类 蛋白质氨基酸： 蛋白质中常见的20种氨基酸 稀有的蛋白质氨基酸：蛋白质组成中，除上述20种常