几丁质酶产生菌的筛选及初步应用的研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

中史摘要产生透明圈的培养基选用分离培养基。将土样(棉田土、稻田土、桔园土、池塘底泥、 中史摘要 产生透明圈的培养基选用分离培养基。将土样(棉田土、稻田土、桔园土、池塘底泥、 水产养殖场的泥土等)或植物器官(水稻、棉花、玉米、烟叶及一些蔬菜的根、茎、 叶)用无菌水稀释(梯度稀释法)，在稀释倍数为10～、10～、10“时分别取O．5ml涂 于分离培养基中，30 0(2培养3～5天，观察透明圈是否产生。 二次分离：继续培养得到的菌株，同样用梯度稀释法在分离培养基中培养菌株单个菌 落，观察其在分离培养基中生长情况。根据生长情况和产生透明圈的大小选出较好的 菌株。 三次分离：在含稻瘟病病原菌细胞壁成分的培养基的平板上培养，在二次分离的基础 E，观察筛选菌株的生长情况，并检测菌株的几丁质酶活性。 微生物几丁质酶活性测定方法：参照Ace介绍的方法。 抑菌实验的方法：参照檀建新和李力介绍的方法。 过氧化氢酶活性测定：按照《植物生理生化实验》中介绍的方法进行。 过氧化物酶活性测定方法：按照《生化实验技术方法和技术》中介绍的方法进行。 苯丙氨酸解氨酶活性和植物几丁质酶活性测定方法：按照《现代植物生理学实验指南》 中介绍的方法进行。 【结果】 1．从自然界中筛选到两株产酶能力较强的几丁质酶产生菌，分别编号为H3和H9。仞 步鉴定结果，H3菌株为苏云金芽孢杆菌，H9可能为青霉菌。 2产酶条件：H3菌株以细