参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用.docVIP

参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用 摘要：目的：研究参芎注射液对老龄大鼠脑缺血再 灌注损伤的保护作用。方法：108只SD大鼠随机分为假手 术组、模型组、尼莫通组、参芎注射液高、中、低剂量组(36. 4, 18.2，9. 1 mL ? kg_l ? d_l)。采用线栓法建立大鼠脑缺血再 灌注模型，观察参芎注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经 功能评分、脑梗死体积的影响，检测脑组织中一氧化氣合酶 (N0S)、一氧化氮(N0)、超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛 (MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量，ELISA法检测对脑组织 中肿瘤坏死因子-a (TNF-a)、白细胞介素-10 (IL-1P ) 水平的影响。结果：参芎注射液可显著降低脑缺血再灌注大 鼠的神经功能评分，减轻脑组织损伤程度，减少脑梗死范E 提高SOD活力，降低MDA，NO, NOS, LDH水平，抑制IL-1 P 和TNF-a的表迗。结论：参芎注射液对大鼠缺血再灌注损 伤具有明显的保护作用，其机制可能与改善神经功能、减少 自由基损伤和抑制炎症因子表达有关。 关键词：参芎注射液；脑缺血再灌注损伤；自由基； 炎症因子；神经功能 ［稿件编号］2013-06-21 ［基金项目］国家自然科学基金项目(81274176 ）；浙江省自然科学基金项目 （LR12H27001）；浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目； 浙江省中医药（中西医结合）重点学科项目（2012-XK-A06） ［通信作者］*杨洁红，Tel:E-mail： yannoo7376@sina. com ［作者简介］汪兴宇，Tel: （0571）E-mail： 489373697@qq. com 近年来，脑缺血再灌注损伤的研究已经引起了国内外学 者的广泛关注，大量研究［1-3］表明脑缺血再灌注损伤主要 与自由基连锁反应、炎症反应、钙离子超载、兴奋性氨基酸 毒性和细胞凋亡等有关。许多研究［4-5］表明丹参和川芎对 脑缺血损伤的氧化、炎症及神经功能损伤等有较明显的改善 作用。参芎葡萄糖注射液为丹参提取物和川芎嗪复合的针 剂，对脑缺血再灌注大鼠的血液流变学、神经细胞凋亡等损 伤有较好的改善作用［6-7］，但有关自由基损伤和炎症损伤 方面的研究较少。本实验采用线栓法建立局灶性脑缺血再灌 注（MCAO）模型，研究参芎注射液对脑缺血再灌注损伤中的 神经功能损伤、自由基损伤和炎症损伤的改善作用，探讨其 对缺血脑组织的保护作用及机制。 1材料 1.1药品和试剂参芎注射液（吉林四长制药有限公司， 批号；尼莫通注射液（Bayer Schering Pharma AG， 批号BXG2GG1）；考马斯亮蓝试剂盒（批、MDA 检测试剂盒（批、一氧化氮（N0）检测试剂盒 （批、SOD试剂盒（批、一氧化氮 合酶（NOS）检测试剂盒（批，以上均购自南京 建成生物工程研究所；IL-1P ELISA检测试剂盒（上海源叶 生物科技有限公司，批）； TNF-a ELISA检测 试剂盒（上海源叶生物科技有限公司，批）; TTC （北京鼎国昌盛技术有限责任公司，批号16S10320）。 1. 2 仪器 Varioskan Flash 型酶标仪（Thermo 公司）； Sigma 2-16PK离心机（Sigma公司）；TU-1900型双光束紫外 -可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；赛多 利斯（Sartorius） BS110S电子天平（北京赛多利斯天平有 限公司）。 1.3动物清洁级SD大鼠，雄性，体重260?300 g，上 海西普尔-必凯实验动物有限公司，许可证号SCXK （沪） 2008-0016。 2方法 2.1分组与给药108只SD大鼠随机分为6组，每组18 只，分别为假手术组（腹腔注射生理盐水）、模型组（腹腔 注射生理盐水）、参穹注射液低、中、高3个剂量组（9.1， 18.2，36.4 mL ? kg-1 ? d-1）和尼莫通组（腹腔注射尼莫通 注射液5. 00 mL ? kg_l ? d_l，相当于尼莫地平1 mg ? kg-1 ? d-1 ）。各组每天腹腔注射给药2次，于手术前连续给药3 d。 2.2脑缺血再灌注模型制备参照Zea Longa等［8］的改 良的线栓法制备大脑中动脉栓塞（MCAO）模型：10%水合氯 酷（3 mL ? kg-1）腹腔给药麻醉大鼠后，分离右领总动脉并 剪一小口，将长50 mm、直径0. 2 mm、顶端烫制成光滑球状 的尼龙线作为栓子插入，以颈总动脉分叉处计算进线深