第三章_生物材料预处理、细胞破碎和液固分离.pptVIP

3.渗透压冲击法 原理： 细胞在浓盐中平衡，再投入水中膨胀破裂。 三、化学法 1.加入化学试剂 采用化学法处理可以溶解细胞或抽提胞内组分。 碱：溶解除细胞壁外大部分组分，改变pH，改变蛋白质的电荷性质 有机溶剂：如丁醇、丙醇、三氯甲烷等，他们能溶解细胞膜上的脂质化合物，使细胞结构破坏，而将胞内产物抽提出来。但是，这些溶剂容易生物活性物质 破环，使用时应考虑其稳定性，操作要在低温下进行，处理后还必须将抽提液中的有机溶 剂进行分离回收。 三、化学法 1.加入化学试剂 表面活性剂：改变膜的通透性，细胞溶解 胞内异淀粉酶：0.1%SDS，30℃振荡30h 2.丙酮粉 保存+破碎 脱水脱脂，细胞结构松散 方法： 组织或匀浆悬浮0.01mol/LpH6.5的磷酸缓冲溶液中，0℃ 一边搅拌，一边徐徐倒入10倍体积的-15 ℃ 丙酮内，10min后离心过滤取其沉淀，反复用冷丙酮洗几次，真空干燥得。 四、生物法 1.酶解法： 机理：利用酶反应分解破坏细胞壁上特殊的化学键 常用的溶酶 G+ 溶菌酶 G- 溶菌酶、EDTA 放线菌 溶菌酶 酵母菌 β-葡聚糖酶 霉菌 几丁质酶、 植物 纤维素酶、半纤维素酶 细胞壁溶解酶是几种酶的复合物 -加入酶：溶菌酶、蛋白酶、脂肪酶、核酸酶等 酶解法的优点 发生酶解的条件温和 能选择性地