染色体核仁组织区染色体带型标本的观察.PPTVIP

* Staining techniques yield characteristic patterns of alternating light and dark chromosome bands. Genes can be localized to specific chromosome bands by in situ hybridization. 实验一 普通光学显微镜的构造、使用方法 --- 染色体、核仁组织区、染色体带型标本的观察 【实验目的】 1. 了解普通光学显微镜的结构、原理。 2. 掌握普通光学显微镜的使用方法。 3. 了解染色体、核仁组织区、染色体带型标本制备的原理。 4. 掌握人类染色体、核仁组织区、染色体带型的特征。 【实验原理】 显微镜的主要部分是目镜和物镜，为两组凸透镜。物镜的焦距短，目镜的焦距较长。当被观察物体AB放在物镜前方的1～2倍焦距之间，光线通过物镜在镜筒中形成一个倒立的放大实像A′B′，这个实像恰好位于目镜的焦平面之内，通过目镜后形成一个放大的倒立虚像A′′B′′。通过调焦装置使A′′B′′落在人眼睛的明视距离（25mm）内，眼睛看到的物体最清晰。A′′B′′的视角比眼睛直接看AB的视角大得多，因此我们可以用显微镜看清非常微小的物体。 普通光学显微镜成像原理图 显微镜的分类 现代显微镜可以分为两大类：一类是光学显微镜，另一类是非光学显微镜 。这两类显微镜又可根据不同的情况分成若干类型 。 普通光学显微镜的基本结构 普通光学显微镜的构造可分为两部分：一为机械装置，二为光学系统 。 机械装置由镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗调节螺旋和微调节螺旋等部件组成。 光学系统由目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片、光圈等组成。 普通光学显微镜基本构造 显微镜的光路 光源→光圈→聚光镜→通光孔→标本（一定要透明）→物镜→镜筒→目镜→眼。 1.取镜和安放 置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为3~4cm。镜检者姿势要端正。 （取、放显微镜时应一手握住镜臂，一手托住底座，使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提；且不论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察，以减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或纪录。） 显微镜的使用 2.低倍镜的操作 置显微镜于固定的桌上，接通电源，打开光源。 将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节推动器，使观察的目的物处于物镜的正下方。 调节粗调螺旋，使物镜（10×）与标本靠近，眼睛在侧向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。 张开双眼向物镜里观察，如果见到目的物，但不十分清楚，可用细准焦螺旋，至目的物清晰为止。 通过玻片夹推进器慢慢移动玻片，认真观察标本各部分，找到合适的目的物，仔细观察并记录所观察到的结果。 3.高倍镜的操作 使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察，发现目的物后将它移至视野正中处。 旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即停止旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，目的物并没有真正找到，必须用低倍镜重新调节。如果高倍镜下观察目的物有点模糊，调节细准焦螺旋，直到视野清晰。调节细准焦螺旋时要注意旋转方向与载物台上升或下降的关系，防止镜头与载玻片强力接触，损坏镜头或载玻片。 4.油镜的操作 如果用高倍镜目的物未能看清，可用油镜。先用低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。 在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移至正中，缓慢调节粗调螺旋使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。然后再用细准焦螺旋微微向上调（切忌不用粗准焦螺旋）即可。 油镜观察完毕，用油镜纸将镜头上的油揩净，另用擦镜纸蘸少许二甲苯揩拭镜头，再用擦镜纸揩干。 （应特别注意不要在下降镜头时用力过猛，或者调焦时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载玻片） 5.换片 观察完一个标本后，如果想要再观察另一标本时，需先将高倍物镜（或油镜）转回到低倍物镜，取出标本，按放片的方法换上新片，即可观察。千万不可在高倍物镜（或油镜）下换片，以防损坏镜头。 6 显微镜使用后的整理 观察结束后，调节光源到最小再关掉电源开关。调节粗调螺旋，使载物台下降到最低，取下玻片，擦干净镜体，罩上防尘罩，然后放回原处。 显微镜的保养及注意事项 （1）油镜使用完毕，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再取一张擦镜纸，滴上少量的二甲苯擦拭，然后再取另一张新擦镜纸将镜头上残留的二甲苯擦净。否则粘固透镜的胶质会被二甲苯溶解，日久镜片易移位脱落。 （2）下降聚光器，打开光圈，使反光镜垂直于镜座，以免积聚灰尘。 （3）用绸布将镜身擦拭干净（切不可用手擦拭），除去灰尘、油污、水汽，以免生锈长霉。 （4）使显微镜的各部件恢复回原位，下降镜筒，使物镜呈“八”字形置于载物