2015-2016学年人教版选修一-微生物的分离、培养和菌种保藏课件(51张).pptVIP

微生物的分离、培养和菌种保藏; 微生物的分离、培养和菌种保藏;目的要求; 实验材料;实 验 程 序;实验程序1 （微生物的分离）;微生物的分离—稀释平板法;;;;图－1 土壤稀释液的制备和稀释液的取样;微生物的分离—平板涂抹法;;;微生物的分离—平板划线法;;; 实验程序2 （微生物的接种方法—斜面接种法）;迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管的底部，轻轻向上划线（直线或曲线）。 接好种的斜面试管口再次过火焰，棉塞底部过火焰后立即塞入试管内。 将沾有菌苔的接种环在火焰上烧红灭菌。先在内焰中烧灼，使其干燥后，再在外焰中烧红，以免菌苔骤热，使菌体爆溅，造成污染。 放下环后，再将棉塞旋紧，在试管斜面上距试管口2～3cm处贴上标签。 28～37 ℃ 恒温培养。 ;无菌操作简介;;微生物的接种方法—液体接种和穿刺??种;; 实验程序3 （微生物培养中的氧气条件）;微生物培养中的氧气条件－厌氧培养;微生物培养中的氧气条件－厌氧培养;;微生物培养中的氧气条件－厌氧培养; 实验程序4 （微生物的菌种保藏方法）;微生物的菌种保藏方法;砂土管保藏法：(可用于保藏产孢子的放线菌、霉菌和产芽孢的细菌）。 1.砂土管的制备：取河沙若干，用40目过筛，出去大颗粒，加10%HCl后煮沸30min，除去有机质（也可用10%HCl浸泡2—4h)。最后倒去酸水，用自来水冲洗至中性，烘干备用。另取0.3m以下非耕作层的瘦黄土若干，晒干磨细，过120目筛。 2.按 土：砂＝1：4 的比例均匀混合，装入指形管中，以1cm高为宜，塞上棉塞，160～170℃干热灭菌2h。 3.在新鲜菌种斜面上加入3mL左右的无菌水，用无菌接种环制成菌悬液，用无菌吸管吸取0.2～0.3ml的菌悬液放入每个砂土管中，用接种环拌匀，并贴上标签，注明菌名。 4.菌液加好后，立即进行抽真空干燥，要求在24h内抽干，尤其是夏天要求较短时间内抽干。摇散砂土，放干燥器内冰箱保藏。;冷冻真空干燥保藏法：此法一般常用于细菌或病毒一类的菌种保藏，常用脱脂牛奶或血清作为菌种的保护剂。 1. 脱脂牛奶的制法：将牛奶加热到80℃左右，然后冷却，除去表面的一层脂肪。这样反复2—3次后用脱脂棉花过滤，并在3000r/min的离心15min，再除去表面脂肪。将脱脂牛奶装入三角瓶中，用0.5kg/cm2高压灭菌30min，连续2次，并作无菌试验。 2. 用无菌的脱脂牛奶将新鲜斜面菌种制成牛奶菌种悬液，无菌操作装入安瓿管中（装量不超过其体积的1/3)。 3. 预冻：将分装好的安瓿管在－25～－40℃ 之间的干冰酒精中进行预冻，1h后即可抽气进行真空干燥。 4.真空干燥：预冻后放入真空干燥箱中，开启真空泵进行干燥。 5.封管前将安瓿管装入多歧管上，开启真空泵，当真空度达到0.01mm汞柱后用火焰熔封。 6.做好的安瓿管放入冰箱中保藏。; 实验程序5 （四大类微生物菌落形态的比较和识别）;四大类微生物菌落形态的比较和识别;;;思 考 题;试验报告;实 验;实验八;实验目的和内容;实验仪器,材料和用具;实验仪器,材料和用具;实验仪器,材料和用具;实验步骤;3.甲基红试验(MR试验) 将大肠杆菌和枯草杆菌分别接种到葡萄糖蛋白胨水培养基中，37℃培养 48h，加甲基红指示剂数滴，观察结果，呈现红色者为阳性，呈现黄色者为阴性。;4.伏-普二氏试验(V.P 试验) 将被检菌接种到葡萄糖蛋白胨水培养基中，37℃培养48h。;5..柠檬酸盐利用试验 取少量被检菌接种到柠檬酸盐培养基上，37℃培养24h后，观察结果。; 6.靛基质(吲哚)试验 将被检菌接种到胰蛋白胨水培养基中，37℃培养24h～48h后。;7.硫化氢试验： 将大肠杆菌和枯草杆菌以接种硫化氢培养基中，37℃培养24h，观察结果。 将滤纸条插入试管，滤纸条的最下端离