家族性高胆固醇血症一家系低密度脂蛋白受体基因致病突变的研究-心血管病理生理学专业论文.docxVIP

主国垫垒匿盘盘堂塑±鲎焦煎妻缩略语表 主国垫垒匿盘盘堂塑±鲎焦煎妻 缩略语表 ApoAI apoprotein AI 载脂蛋白AI ApoBioo apoprotein Bioo 载脂蛋白B100 As atherosclerosis 动脉鬻样硬化 bp base pair 碱基对 CAD coronary artery disease 冠心病 DEPC diethyl pyrocarbonate 二乙基焦碳酸乙酯 DHPLC denaturing high performance liquid chromatography 变性高效液相色谱 EB ethidium bromide 溴化乙锭 EDTANa， edathamil disodium 乙二胺四乙酸二钠 FDB familial defective apoprotein B 家族性载脂蛋白B缺陷症 FH familial hypercholesterolemia 家族性高胆固醇血症 HDL—C high density lipoprotein cholesterol 高密度脂蛋白胆固醇 HMGCoA 3-hydroxy-3·-methylglutaryl·-coenzyme A 3一羟基一3一甲基戊二酰辅酶A IDL intermediate density lipoprotein 中间密度脂蛋白 IPTG isopropyl一1-thil-B-D-galactoside 异丙基硫代．B．D-半乳糖苷 LaeZ galactosidase a-peptide gene 半乳糖苷酶17．一肽基因 LB Luria-Betani medium LB培养基 LDL—C low density lipoprotein cholesterol 低密度脂蛋白胆固醇 LDLR low density lipoprotein receptor 低密度脂蛋白受体 ORF open reading frame 开放阅读框架 主国垃盘匡盘盘堂塑±堂焦盈圭PCR 主国垃盘匡盘盘堂塑±堂焦盈圭 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PEG8000 polyethylene glycol 8000 聚乙二醇8000 RT．PCR revert transform polymerase chain reaction 逆转录聚合酶链式反应 SDS sodium dodecyl sulfate 十二烷基磺酸钠 SR scavenger receptor 清道夫受体 SSCP single strand conformation polymorphism 单链构象多态性 TC total cholesterol 总胆固醇 TG triglyceride 甘油三酯 Tris trihudroxymethyl 三羟甲基氨基甲烷 VLDL very low density lipoprotein 极低密度脂蛋白 X—gal 5-bromo一4-chloro一3一indolyl—B-D—galactoside 5一溴一4一氯一3一吲哚-B．D一半乳糖苷 ．2． 士国盐垒匡盘盘鲎塑±堂焦盈圭中 士国盐垒匡盘盘鲎塑±堂焦盈圭 中 文摘 要 旧盼 建立快速、有效地检测低密度脂蛋白受体(10w density lipoprotein receptor， LDLR)基因突变的方法，并对一家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia，FH)家系LDLR基因进行分析，比较FH患者LDLR基因突变 特征及其与表型的关系，初步探讨突变位点与FH之间的关系。 卜 ／’方法 以一FH家系为研究对象，详细调查患者饮食、生活习惯及家族史并进行心血 管系统全面检查；提取外周血白细胞DNA，采用错配巢式PCR、Msp I限制性内切酶 分析和PCR产物直接测序法检测载脂蛋白B100(apoprotein B100，Apo B。。，)3500 突变以排除家族性载脂蛋白B缺陷症(familial defective apoprotein B， FDB)；改进PCR扩增条件使同一反应体系和循环参数扩增LDLR基因21个片段：变 性高效液相色谱(denaturing high performance 1 iquid chromatography， DHPLC)异源双链分析检测点突变；对异常峰形的PeR产物进行克隆测序并与 Genbank同源性比较，发现突变位点，分析突变性质，并在家系分析中验证该突 变。 结果 该FH家系Apo B100 3500未见突变；先证者体检显示心血管系统严重缺血性损 伤，其LDLR基因存在第3内含子5’剪接位点G_+A纯合突变；外显子IOA存在2