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第四章 噬菌体 病原与免疫学科 梅 雪 在固体培养基上,若用适量的噬菌体和宿主菌液混合后接种培养,培养基表面可有透亮的溶菌空斑出现。一个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解细菌后形成,称为噬斑(plaque),不同噬菌体噬斑的形态与大小不尽相同。 在液体培养基中,噬菌现象可使浑浊菌液变得澄清。 噬菌体(Bacteriophage):是能感染细菌、放线菌、真菌、螺旋体的病毒。 二.特点 1.体积微小,分布广泛,种类多。 2.具有严格的寄生性。只有在活的微生物细胞中才能增殖。 3.具有高度的特异性。只寄居于易感宿主菌体内。 噬菌体很小,在光镜下看不见,需用电镜观察。不同的噬菌体在电镜下有三种形态:蝌蚪形、微球形和丝形。大多数噬菌体呈蝌蚪形,由头部和尾部两部分组成。 蝌蚪形噬菌体结构模式图 四. 分类 根据噬菌体与宿主菌的相互关系,噬菌体可分为两类: (一)溶菌性噬菌体(virulent phage):又称为毒性噬菌体。能在宿主细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体,并最终裂解细菌。 其溶菌过程:吸附,穿入,增殖,溶菌 (二)溶原性噬菌体 有些噬菌体不在敏感细菌内增殖,其基因整合于细菌基因组中,成为细菌DNA的一部分,当细菌分裂时,噬菌体的基因亦随着分布至两个子代细菌的基因中。这种噬菌体称为溶原性噬菌体(Lysogenic phage)或温和噬菌体(Temperate phage)。 整合在细菌DNA上的噬菌体基因称为前噬菌体(Prophage),带有前噬菌体的细菌称为溶原性细菌(Lysogenic bacterium)。其所处的状态称为溶原状态。 带噬菌体的溶原状态不是永久不变的。有时在一定条件下如:紫外线,X线,突变剂等因素作用下能自发终止,结果导致噬菌体增殖而引起细菌裂解。 五. 噬菌体的应用 1.细菌的鉴定与分型 噬菌体与宿主菌的关系具有高度特异性,即一种噬菌体只能裂解一种和它相应的细菌,故可用于未知细菌的鉴定和分型。 2.分子生物学研究的重要工具 噬菌体基因数量少,早已成为研究核酸的重要对象。而且可作为基因的运载体,在遗传工程上起着重要作用。 3.检测标本中的未知细菌 第五章 细菌的遗传与变异 病原与免疫学科 一.细菌的遗传物质基础 1.染色体 是细菌遗传的物质基础。细菌染色体就是它的核质DNA。 2.质粒 接合性质粒,非接合性质粒 二.细菌的变异类型及其机制 (一)表型(非遗传性)变异 由于外界环境条件发生变化引起的称为表型变异。表型变异因为并未发生细菌基因型的改变,不能遗传,所以是非遗传变异。 例如:大肠杆菌可因环境中持续存在乳糖而合成与乳糖代谢有关的酶类(诱导酶),这种酶可使乳糖分解,一旦乳糖不存在了,这种酶类也随之消失。 (二)基因型(遗传性)变异 1.概念: 基因变异是细菌自身遗传物质发生改变,从而获得新性状,能传给子代。基因型变异能使细菌产生变种与新种,有利于细菌的生存及进化。 基因型与表型变异的比较: 基因型 表型 1.基因结构 变化 未变 2.可逆性 不或极少 可逆 3.受环境影响 不受影响 受 4.稳定性 相当稳定 不稳定 2.基因变异的机制 (1)突变 定义:是细菌遗传物质的结构发生突然而稳定的改变。 特点: A.可发生在细菌细胞内任何一个基因。 B.可传给子代。 C.也可再次突变回复到原来的性状-回复突变。 D.突变在生长繁殖过程中经常发生。 (2)基因的转移与重组 提供DNA的细菌为供菌,接受DNA的细菌为受菌。两个细菌之间可发生细菌的转移与重组 ① 转化(transformation): 是受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段, 通过与染色体重组,获得了供体菌的部分遗传特性。 ② 转导 是指寄生在细菌体内的噬菌体溶菌后,携带宿主的遗传物质浸染另一菌株,从而使后者按前者的性状发生变异。 注意:另一细菌必须是“溶原性细菌” ③溶原性转换 是指噬菌体感染细菌时,将本身的DNA与受染菌染色体重组。使寄主遗传结构发生改变而导致基因变异。 ④接合 是指供菌和受菌相互直接接触传递大片断DNA的变异现象,是细菌的有性生殖过程,又称细菌杂交。 三.常见的细菌变异现象及其在医学实践中的意义 1.细菌的毒力变异 细菌的毒力变异可表现为毒力增强或减弱。卡介二氏(Calmette-Guerin)将有毒力的结核杆菌在含有胆汁的甘油
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