Western及IP细胞裂解液（无抑制剂）.PDFVIP

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：order@ 技术咨询：info@ 碧云天网站 微信公众号 网址： Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) 产品编号 产品名称 包装 P0013J Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) 100ml 产品简介：  Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)(Cell lysis buffer for Western and IP without inhibitors) ，是一种在非变性条件下裂解细胞的 裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞，可以用于PAGE ，Western ，免疫沉淀(immunol precipitation ，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和 ELISA等，以及许多兼容1% Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。使用本裂解液时，用户可以根据具体用途自行 添加特定抑制剂或者不添加抑制剂。  Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) 的主要成分为20mM Tris (pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，不含蛋白酶、磷酸酯 酶等抑制剂。在添加蛋白酶抑制剂的情况下，可以有效维持原有的蛋白间相互作用。  使用本裂解液获得的蛋白样品，如果用于酶活性检测或一些生物小分子的检测，需要测试标准品用本裂解液稀释后是否会 显著影响标准曲线。如果本裂解液对于标准曲线无显著影响，则可以使用本裂解液。  用Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)裂解得到的蛋白样品，可以用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/ P0010S/P0011/P00 12/P0012S)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定由本裂解 液裂解得到样品的蛋白浓度。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 P0013J Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) 100ml — 说明书 1份 保存条件： -20ºC保存，一年有效。频繁使用时，可以短期4ºC保存。 注意事项：  如需添加蛋白酶等抑制剂，需自行准备。  裂解样品的所有步骤都需在冰上或4ºC进行。  关于裂解液的选择，一方面可以参考碧云天的相关网页：/support/lysis-buffer.htm 选择合适的裂解 液；另一方面也需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。  本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 对于培养细胞样品： 1. 融解Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) ，混匀。取适当量的裂解液，根据需要自行确定添加适当的抑制剂或不添加抑制 剂。 2. 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS 、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗) 。按照6孔 板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒 后，细胞就会被裂解。 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。 再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。