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医学微生物学 第五章 细菌感染的检查方法与防治原则 第一节 细菌感染的诊断 包括; 细菌学诊断——检测病原菌及其抗原,产物或核酸 血清学诊断——检测患者血清中特异性抗体 一、病原菌检测 早期采集 应在使用抗菌药物前采集标本,否则注明药物种类。 无菌采集 尽量避免杂菌污染。 根据不同疾病以及疾病不同时期采取不同标本。 标本必须尽快送检,或冷藏送检。 标本做好标记,详细填写化验单,保证各环节的准确无误。 二 血清学诊断 用已知的细菌或其特异性抗原检测患者血清或其它体液中特异抗体和其效价的动态变化,可作为某些感染性疾病的辅助诊断。一般采取病人的血清进行试验,故称为血清学诊断(serological diagnosis)。 血清学诊断最好取患者急性期和恢复期双份血清标本,当后者的抗体效价比前者升高大于等于4倍时方有意义。 第二节 细菌感染的特异性预防 死疫苗 活疫苗 二、 人工被动免疫 抗毒素 丙种球蛋白 抗菌血清 两种人工免疫的比较 Future vaccines Synthetic peptides that correspond to antigenic determinants on a viral protein. Edible vaccines. transgenic plants synthesizing antigens from pathogenic viruses. * 标本采集与送检原则 致病菌的检验程序 标本 直接涂片染色镜检 分离培养与鉴定 病原菌抗原检测 其它检测 涂片镜检 菌落特征 生化反应 药敏试验 血清学反应 免疫荧光 酶联免疫测定 免疫印迹 细菌核酸 (PCR) 基因芯片 动物试验 Hood and chamber for anaerobic culture Blue indicate oxygen Microscopy and stains Simple and less sensitive (bacteria No. 105/ml) Gram positive (Staphylococcus) Gram negative (E.coli) Acid fast stain Mycobacterium tuberculosis, From:CDC 血平板上的 金黄色葡萄球菌菌落(黄色)及 表皮葡萄球菌菌落(白色) 梅毒螺旋体Treponema pallidum (pathogen of syphilis) 直接荧光抗体检测Direct fluorescent antibody test (From Morse S et al: Atlas of sexually transmitted diseases and AIDS, St Louis, 2003, Mosby.) 恢复期 Convalescent phase 急性期Acute phase 直接凝集试验The Fab portions of the antibodies link microorganism together causing agglutination on the slide From: Dr.Gary E. Kaiser 常用方法:直接凝集试验、乳胶凝集试验、ELISA。 A microarray is a set of short Expressed Sequence Tags (ESTs) made from a cDNA library of a set of known gene loci. The ESTs are spotted onto a cover-slip-sized glass plate. ?mRNA are prepared from the tissue of a control organism and an experimental treatment. Complementary DNA (cDNA) are prepared and labelled with two different fluorescent dyes. The experimental and control libraries are hybridized to the microarray. Dual-channel laser excitation excites the corresponding dye, which fluoresces proportional to the degree of hybridization that has occurred. Relative gene expression is measured as t
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