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课件:糖化血红蛋白实验室检测基础及标准化进展.pptx
糖化血红蛋白实验室检测及标准化新进展Hannah YaoSep 10, 2014 青岛 HbA1c实验室检测糖化血红蛋白的发展历史概述HbHbA(????)HbA2(????)HbF(????)95%1-3.5%2%HbA0HbA16-8%87-89%HbA1bHbA1cHbA1a糖化和非糖化的血红蛋白血红蛋白成人血红蛋白分三种,HbA为主要成人Hb非糖化Hb糖化HbHbA1a: ?链NH2端与其它糖成分结合的产物HbA1b: HbA1c进一步代谢的产物HbA1c: ?链NH2端与葡萄糖结合的产物1%1%4%-6%胎儿血红蛋白HbF在胎儿及出生6个月以内的新生儿体内为高浓度,6个月后基本降为成人水平HbA1c是血红蛋白HbA的糖基化产物葡萄糖与血红蛋白HbA发生糖化反应两步反应: 先快速生成不稳定A1c, 后缓慢生成稳定的A1c。血红蛋白HbA糖化后,负 电荷会增加HbA1c 的主要检测方法HbA (a2b2)HbA1HbA0非糖化成分HbA1aHbA1bHbA1c糖化成分各检测方法的分析物离子交换色谱和免疫法检测物硼酸亲和色谱检测物离子交换HPLC检测原理A:患者红细胞裂解物被注入到带有负电荷的分析柱中B, C:因为与带负电荷树脂间的离子相互作用,带正电荷的血红蛋白分子的移动速度比带负电荷的慢D:因为HbA1c比HbA0所带负电荷强,所以首先被洗脱.E:离子交换HPLC方法能分离并鉴定其他种类Hb及一些血红蛋白变异体,在色谱图上将出现相应的分离峰Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences, Am J Clin Pathol 2014;141:5-16国内上市的IE-HPLC方法的主要厂家平台厂家仪器Bio-RadVARIANT II Turbo HbA1c Kit-1.0/2.0VARIANT II HbA1c ProgramD-10 Hemoglobin A1c ProgramTosohG7G8GXArkra海惠中MQ2000MQ2000PT国内上市的LPLC方法的主要厂家平台厂家仪器深圳普门GH-900 HbA1c AnalyzerDrew Scientific../../../Lab%20date/NCCL%20HbA1c%202014%20dates.xlsDrew DS5Diastat江苏奥迪康AC660毛细管电泳法的检测原理Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences, Am J Clin Pathol 2014;141:5-16毛细管电泳分离血红蛋白组分是基于电荷等决定的电泳迁移率一种高压电源产生电场,使分子通过毛细管从阳极迁移到阴极。患者红细胞裂解液中带正电荷的血红蛋白组分将首先被检测到,其次是中性物质,最后由带负电荷的血红蛋白组份。电泳图谱显示HbA1c与HBA0分离。Sebia 糖化产品概览MiniCAP Capillary 2 Capillary2 with Flex Piercing *(Capillary2 with Flex Piercing 为Capillary2 的升级版,只多了可采原始样本管,其他参数一致) with Flex Capillarys 2 with Flex Piercing 是Sebia糖化系统中的唯一有CFDA证的,8个通道同时使用时,1.6分钟/检测。全国总代理-广州执信价格: 30元/测试(到代理商)今年在全国主要地区推广力度强,特别在南方两广地区是该公司传统重要市场硼酸亲和色谱法的原理A:患者的红细胞裂解液注入到含有结合了硼酸基团的树脂的分析柱中。B:在pH高于8.0时,血红蛋白被糖化后产生一个特殊的顺式二糖醇基团与硼酸基团发生反应C:糖化的血红蛋白被绑定在分析柱中,而非糖化的血红蛋白组分直接流出D酸性缓冲液被使用,使得糖化的血红蛋白从分析柱内释放出来图E是一种简化的色谱图(蓝线),显示了非糖化和糖化血红蛋白组分的分离。Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences, Am J Clin Pathol 2014;141:5-16硼酸亲和色谱法特点硼酸亲和色谱法直接检测的是总糖化血红蛋白,报告结果是计算出来的 HbA1c。硼酸亲和色谱法不能分离出血红蛋白变异体国内上市的硼酸亲和色谱法的主要厂家平台厂家仪器PrimusHb9210PDQ PlusUltra2Bio-RadIn2itAlereAfinionNycoCard免疫分析法检测原理-抗原抗体反应Pathology Consultation on H
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