初级生产力的测定.docVIP

水生生态系统初级生产力的测定——叶绿素法 一、实验目的 1.学习测定水体初级生产力的原理和操作过程。 2.学习估算水体初级生产力方法，为评价水体生产性能做准备。。 实验原理 叶绿素a是植物光和作用的重要光合色素，在一定的光照强度下，叶绿素a的含量与光合作用强度之间存在密切关系，因此，叶绿素a的含量是水生生态系统初级生产力的中的重要指标。同时，叶绿素a的含量的测定，也可以用于水体富营养化水平的评价，是水质监测的重要项目。浮游植物叶绿素的测定方法常用分光光度法，初级生产力Ps=CaQ(Q=3.7) 三、实验器具及试剂 采水器、抽滤器、研钵、滤纸、玻璃棒、矿泉水瓶、分光光度计、离心机、漏斗、丙酮等 实验步骤 取适量水样，加少量碳酸镁粉，经滤膜减压过滤，截留水样的浮游植物细胞；将滤膜放入冰箱低温干燥后，以90％丙酮研磨提取样品滤膜，将滤液离心分离，提取上清液定容10mL 比色管，于1cm比色皿中，以90％ 丙酮为参比，在TU- 1901 型分光光度计于750nm、663nm、645nm、630nm 波长处测定吸光度值后，按下式计算叶绿素含量。叶绿素a （mg/m3） = [11.64（A663- A750）- 2.16(A645- A750)+0.10(A630- A750)]×V1/(V×C) 五、实验结果 1.叶绿素a吸光值的测定 波长（nm） 630 645 663 750 吸光值D 0.020 0.019 0.036 0.014 表1 不同叶绿素a的吸光值 叶绿素a含量的计算 叶绿素a （mg/m3） = [11.64（A663- A750）- 2.16(A645- A750)+0.10(A630- A750)]×V1/(V×C) C——比色皿光程(1cm)； A—— 吸光度； V1——提取液定容后体积(mL)； V——水样体积(L) 所以 叶绿素a的含量Ca=11.64（0.036- 0.014）- 2.16(0.019- 0.014)+0.10(0.020- 0.014)]×2.8/(0.5×10)=1.374（mg/m3） 2.初级生产力的估算 Ps=1000CaQ Ca——为表层叶绿素a含量（mg/m3） Q——通话系数（3.7） 所以 Ps=1000CaQ=1.374×3.7=5.0801 六、分析和讨论 结果分析 有以上数据显示，华师湖泊表层水的叶绿素含量为1.374（mg/m3），初级生产（mgC/mgChla.h）。初级生产力取决于自养生物的现存量及其组成、养分、光、温度、水的运动以及动物的摄食等生态因子[1]。而叶绿素a 是反映水体初级生产力一个指标，也是湖泊富营养化的重要参数，水质监测技术规范中规定湖泊水库叶绿素a 属于常规监测项目。因此对地表湖泊表层水叶绿素a的测定是非常重要的。 影响叶绿素a含量的因素： ①在测定过程中，用于抽滤的滤膜通透性也会影响叶绿素a浓度的测定结果。由于不同通透性的滤膜，过滤后的残留物的量会有一定的差异[2]，因此叶绿a素的含量就会受到影响。②取水的位置，由于湖泊水中自养生物的分布位置不同，取水样的深度不一样，水样中自养生物的含量就会有差异，因此叶绿素a的含量也会不同。③取水的时间和天气，同一天中不同时刻和不同天的同一时刻所取到的水样也会有差别。 注意事项 ①叶绿素a 易分解，提取液浓度随时间延长而降低，因此，提取后尽快测量吸光值。②丙酮有毒，操作过程中应注意安全。③离心后取上清液时不能摇动，以防取到沉淀物，影响吸光值的测定。 七、参考文献 [1] 司大英.测定生产力中 叶绿素a 的方法探讨[J].环境工程,2000,18(3):52-53. [2] 韩桂春,等. 淡水中测定叶绿素方法探讨[J].中国环境监测,2005,21(1):55-57