重组DNA技术（教学）课件.pptVIP

重组DNA技术;基本概念;基本概念;基本概念;基本概念;自然界DNA重组和基因转移是经常发生的 ;重组DNA技术的发展简史;第一节 重组DNA技术的基本过程 ;第二节 重组DNA技术中常用工具酶 ;一、限制性核酸内切酶;（一）限制性核酸内切酶的命名 ;（二）限制性核酸内切酶的类型 ;（三）Ⅱ型限制性核酸内切酶; 识别序列特点： 回文结构(palindrome) ;（1）产生5? 突出粘性末端 (sticky end);（2）产生3? 突出粘性末端;（3）产生平末端 (blunt end);同裂酶（isoschizomer） 又称异源同工酶，指来源不同识别序列相同的酶 同尾酶（isocaudamer） 识别序列与切割位点相互有关的一类酶 可变酶 此类酶是Ⅱ型限制酶的特例，识别DNA序列中的一个或几个碱基是可变的，并且识别序列往往超过6个核苷酸;(四）限制酶作用的影响因素 ;名　　称　　 　识别序列及切割位点;二、 连接酶(DNA ligase);常用的DNA连接酶;①DNA连接酶对黏性末端的连接效率远高于平末端的连接效率。 ②连接黏性末端的温度一般在4～15℃。 ③连接酶的用量在平末端连接高于黏末端。 ④ATP的反应浓度：10μmol/L～1 mmol/L。 ⑤载体与目标基因的摩尔数比值：1∶10～1∶3。;三、DNA聚合酶 ;四、其它修饰酶 ;*;2.多核苷