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稳定性和亚基相互作用强度.PDF

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第 36卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E)  研究报告 第 8期                           2008年 8月 Ch ine se Journal of Analytical Chem istry 1045 ~1050 棕色固氮菌细菌铁蛋白捕获能力、稳定性和亚基相互作用的强度 1, 2 1 1, 3 1 1, 2 , 3 黄 琳  陈 旭  罗联忠  林 青  黄河清 (1 厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室 , 2 化学化工学院固体表面物理化学国家重点实验室 , 3 化学生物学福建省重点实验室 , 厦门 361005) ( ) ( 摘  要  选用柱层析 、电泳和反相高效液相色谱 RPHPLC 技术制备质谱纯棕色固氮菌细菌铁蛋白 B acteri ) ( al ferritin of A zotobacter vineland ii, AVB F , 并采用释放铁动力学和肽质量指纹图谱 Pep tide m a ss fingerp rint ) ( ) ing, PM F 技术分别鉴定 AVB F。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALD ITOF M S 和电泳技术揭示 ( ) AVB F亚基之间相互作用强度 、稳定性和聚合态 。AVB F 可直接捕获有机小分子亚 甲蓝 MB ,其捕获率为 ( ) 15. 0 ±2. 0 MB /AVB F,认为介于 AVB F亚基单体之间的血红素参与捕获 MB 。较高浓度 40% ~50% 的乙腈 ( ) ( 和丙酮均能使 AVB F和鲨鱼肝铁蛋白 L iver ferritin of shark, SLF 释放不稳定亚基 ,但在较低浓度 20% ~ 30% ) 的乙腈条件下 ,却需要借助来源于质谱仪的激光才能使 AVB F 或 SLF释放不稳定亚基 ,并供质谱分析 。 AVB F亚基之间的相互作用强度明显低于 SLF。铁蛋白亚基之间的相互作用强度高低与铁蛋白执行释放和储 存铁的速率有关 。 关键词  细菌铁蛋白, 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 , 电泳 ,亚基 ,相互作用 ,稳定性 ,捕获能力 1 引 言 铁蛋白是一种高效储存铁的蛋白质 ,存在

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