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农产品品质分析 第七章 农产品品质分析 第一节 植物中可溶性糖的测定 第二节 糖料作物中蔗糖的测定 第三节 植物中淀粉的测定 第四节 植物中蛋白质测定 第五节 植物中脂肪测定 第六节 植物中粗纤维测定 第一节 植物中可溶性糖的测定 一、概述 二、还原糖测定（斐林－碘量法） 三、还原糖测定（索姆吉微量法） 四、还原糖测定（蒽酮比色法） 一、概述 植物体中的可溶性糖，通常指葡萄糖、果糖(单糖)及蔗糖(双糖)三种。它们都溶于水(故亦有称水溶性糖的)，也易溶于酒精中。 植物体中糖分的含量依作物种类、品种特性及生育时期变化很大。外界环境条件例如气温、光照、雨水、施肥等许多因素，也影响糖分的含量。 作物在贮藏过程中，糖分不断变化：开始时由于多糖的水解而糖分含量增加，而后期又因呼吸作用而消耗了糖分。 因此，可溶性糖分的测定，对于鉴定作物品质，以及对于改进栽培技术和选择合适的贮藏方法都具有很大意义。 一、概述 二、还原糖测定（斐林－碘量法） （一）方法原理 （二）试剂配制 （三）操作步骤 （四）注意事项 （一）方法原理 在严格规定的条件下，待测液中的还原糖与已知量的、过量的氧化剂斐林试剂完成氧化还原反应后，用碘量法测定剩余氧化剂的量，由净消耗的氧化剂的量来求得还原糖的含量。 还原糖与斐林溶液的氧化还原作用，须在沸热的条件下进行。此时斐林试剂使还原糖氧化和降解(脱羧)，生成葡萄糖一酸和CO32—， 同时二价铜还原为氧化亚铜沉淀。 （一）方法原理 上述反应完成后，将溶液酸化并加入KI，由剩余斐林试剂所得的Cu2+即与I—作用析出I2和Cu2I2淡黄色沉淀： 2Cu2++4I———Cu2I2+I2 生成的I2可用标准Na2S2O3液滴定 ： I2+2S2O3 2— S4O6 2—+2I— 最后，由试剂空白标定与样品测定时所用Na2S2O3溶液毫升之差，查系列标准葡萄糖毫克数与Na2S2O3毫克数绘制的标准曲线即可求得还原糖的量。 （二）试剂配制 1、斐林A溶液：硫酸铜CuSO4·5H2O 50克，加水溶解，过滤，加0.5毫升浓H2SO4，定容于1000毫升容量瓶。 2、斐林B溶液：氢氧化钠150克，酒石酸钾钠KNaC4H4O6·4H2O 200克，溶解后定容于1000升容量瓶。使用前也可将斐林A、B两液等体积混合成斐林试剂。 （二）试剂配制 3、25％碘化钾溶液：125克碘化钾溶解于水中，加3mol/lNaOH 1ml，加水至500毫升，贮存于冷暗处。 4、3 mol/l硫酸溶液：将167毫升浓H2SO4缓缓注入833毫升水中。 5、0.5％淀粉指示剂：淀粉1克加少量水拌匀，缓缓倾入200毫升沸水中，搅拌成稀度透明液。 （二）试剂配制 6、0.05mol/l 1/2硫代硫酸钠溶液：先配制1mol/l 1/2Na2S2O3溶液，即将124克Na2S2O3·5H2O溶于1000毫升煮沸后已冷却的水中，另加无水碳酸钠2克。取1mol/l 1/2Na2S2O3液250毫升，用煮沸后已冷却的水稀释成5升(每升加HgI10毫克防腐)，溶液贮于棕色瓶中放暗处。 （三）操作步骤 1、糖溶液的提取 2、还原糖的测定 3、标准曲线的绘制 1、糖溶液的提取 （1）水提取法 （2）酒精提取法 （3）双糖(蔗糖)的水解 （1）水提取法 新鲜样品称重后研磨或匀浆，洗入250毫升容量瓶，约150ml时，加2—3滴甲基红指示剂，如呈红色可用0.1mol/lNaOH中和至微黄色。 风干样品称重后加少量水润湿后，洗入250毫升容量瓶中，同上中和其酸性。然后放入80℃水浴中保温30分钟，其间摇动数次，使糖分完全转入溶液中。 含蛋白质多的样品，须加醋酸铅沉淀。 最后加水至刻度，摇匀后过滤。 （2）酒精提取法 对含有大量淀粉或菊糖的样品，用水提取会使部分糊精或菊糖进入溶液而影响分析结果，同时过滤也困难，为此，最好采用酒精提取法：将研磨成糊状的样品加80％酒精100毫升，安装上回流冷凝管，在水浴上80℃保温提取三次，第一次30分钟，后两次各15分钟，合并三次溶液，在85℃水浴上蒸发酒精提取液，一直到酒精溶液只剩下大约3—5毫升时，用水洗入250毫升容量瓶中定容，即为糖的提取液(酒精提取液不必除蛋白质，因蛋白质不会溶解出来)。 （3）双糖(蔗糖)的水解 酸水解：吸取上述澄清的糖液50毫升，放入100毫升容量瓶中，将容量瓶放入预热到80—82℃水浴中，当温度上升至60℃后，加入3毫升浓HCl于糖液中，继续保持8分钟取出容量瓶，迅速冷却，以甲基红为指示剂，用饱和Na2CO3中和至金黄色，加水至刻度，此时蔗糖已水解为还原糖。 2、还原糖的测定 吸取待测糖液5—15毫升（含糖在2—20毫克范围）于小三角瓶中，准确加斐