正常与乳腺肿瘤细胞表面黏附分子CD44活化状态差异分析-检验医学.PDFVIP

检验医学２０１３年５月第２８卷第５期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｍａｙ２０１３，Ｖｏｌ２８．Ｎｏ５． ·４２５· 文章编号：１６７３８６４０（２０１３）０５０４２５０５　　　中图分类号：Ｒ４４６．６　　　文献标志码：Ａ　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３８６４０．２０１３．０５．０２０ 正常与乳腺肿瘤细胞表面黏附分子ＣＤ４４活化状态差异分析 侯利丹，　刘 雯，　何怡青，　杨翠霞，　杜　艳，　高　锋 （上海交通大学附属第六人民医院中心实验室，上海２００２３３） 　　摘要：目的　检测黏附分子ＣＤ４４在正常和乳腺肿瘤细胞表面的表达，并分析其活化状态差异，为以ＣＤ４４ 为靶点的肿瘤靶向治疗提供新的理论依据。方法　采用流式细胞术检测２０名正常人外周血单个核细胞 （ＰＢＭＣｓ）、正常小鼠胚细胞ＮＩＨ３Ｔ３及人乳腺肿瘤细胞Ｈｓ５７８Ｔ、ＢＴ５４９表面ＣＤ４４表达水平；使用荧光标记透明 质酸（ＦＬＨＡ），通过流式细胞术分析ＣＤ４４的活化状态；再运用细胞免疫荧光的方法观察 ＨＡ与不同活化状态 ＣＤ４４的靶向结合情况。结果　正常人ＰＢＭＣｓ、ＮＩＨ３Ｔ３与乳腺肿瘤细胞Ｈｓ５７８Ｔ、ＢＴ５４９表面均高表达ＣＤ４４，阳 性表达率＞９５％。ＰＢＭＣｓ、ＮＩＨ３Ｔ３的ＣＤ４４与ＦＬＨＡ结合活性相对较低，分别为（３．６１±２．６５）％ 和（１４．３３± １．３５）％，而乳腺肿瘤细胞表面ＣＤ４４与ＦＬＨＡ结合活性高（＞９０％）。细胞免疫荧光显示 ＮＩＨ３Ｔ３细胞表面基 本无荧光，ＨＡ不靶向结合ＣＤ４４，而Ｈｓ５７８Ｔ和ＢＴ５４９细胞表面呈现强荧光，ＨＡ靶向结合ＣＤ４４。结论　正常细 胞ＰＢＭＣｓ、ＮＩＨ３Ｔ３表面虽然高表达 ＣＤ４４，但与其天然配体 ＨＡ结合活性较低，而乳腺肿瘤细胞表面高表达 ＣＤ４４且与其配体ＨＡ结合活性很高。提示ＣＤ４４分子在正常和肿瘤细胞表面存在相对静止与活化２种状态，前 者与ＨＡ结合活性较低，后者与ＨＡ结合活性高。提示以ＨＡ为靶向分子、ＣＤ４４为靶点的抗肿瘤药物，能够选择 性杀伤高表达ＣＤ４４的肿瘤细胞而不影响正常细胞。 关键词：ＣＤ４４；活化状态；乳腺肿瘤；外周血单个核细胞 　　ＡｎａｌｙｓｉｓｏｎｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｓｕｒｆａｃｅａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅＣＤ４４ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｓｔａｔｅｓｉｎｎｏｒｍａｌｃｅｌｌｓａｎｄｂｒｅａｓｔ ｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ　ＨＯＵＬｉｄａｎ，ＬＩＵＹｉｗｅｎ，ＨＥＹｉｑｉｎｇ，ＹＡＮＧＣｕｉｘｉａ，ＤＵＹａｎ，ＧＡＯＦｅｎｇ．　 （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｅｎｔｒａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＳｈａｎｇｈａｉＳｉｘｔｈＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００２３３，Ｃｈｉｎａ） 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｓｕｒｆａｃｅａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅＣＤ４４ｉｎｎｏｒｍａｌｃｅｌｌｓａｎｄｂｒｅａｓｔ ｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ，ａｎｄａｎａｌｙｚｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆＣＤ４４ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｓｔａｔｅｓｉｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｎｅｗｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒ ＣＤ４４ｔａｒｇｅｔｅｄｃａｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣＤ４４ｉｎｎｏｒｍａｌｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ （ＰＢＭＣｓ），ｎｏｒｍａｌｍｏｕｓｅｆｉｂｒｏｂｌａｓｔＮＩＨ３Ｔ３ｃｅｌｌｓａｎｄｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔｔｕｍｏｒｃｅｌｌＨｓ５７８ＴａｎｄＢＴ５４９ｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙ ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．ＴｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｓｔａｔｅｓｏｆＣＤ４４ｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ｕｓｉｎｇｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｌａｂｅｌｅｄｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ（ＦＬＨＡ），ａｎｄｔｈｅｎｔｈｅｔａｒｇｅｔｅｄｂｉｎｄｉｎｇａｂｉｌｉｔｙｏｆＨＡＣＤ４４ｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｃｅｌｌｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ．Ｒｅｓｕｌ