现代生物技术与新药研究 第十讲 免疫调节剂与核酸药物的筛选研究策略.ppt

第十讲 免疫调节剂与核酸药物的筛选研究策略 胡海峰 主要内容 免疫调节剂 定义 免疫抑制剂 免疫增强剂 核酸药物 定义 作用机理 品种实例介绍 人体免疫及其功能 免疫，又称是免疫性或免疫力，是指机体在识别自我的基础上，辨别、消灭和排除抗原性异物以维护机体的稳定性和生理平衡的过程。 对人体主要有以下三大功能1、 防疫功能：免疫能帮助机体消灭与消除入侵之“敌”—病原微生物及其抗原。2、 稳定功能：免疫能帮助机体消除新陈代谢中损伤与衰老死亡的细胞，维持机体内部的“治安”。3、 监控功能：免疫能帮助机体抑制和消灭癌细胞持续性感染。如有的人患病症没用药而自然痊愈，即是免疫的作用。 免疫调节（Immunoregulation） 免疫调节 主要是指在免疫应答过程中，各种免疫细胞与免疫分子相互促进和抑制，形成正负作用的网络结构，并在基因的控制下，完成免疫系统对抗原的识别和应答。 免疫调节（Immunoregulation） 免疫分子的调节作用 1 抗体封闭抗原作用（结合抗原表位，阻止识别，抑制体液免疫应答） 2 免疫复合物的调节作用 （免疫复合物既可促进免疫应答，又可抑制免疫应答） 3 免疫细胞表面调节性受体的作用 【激活受体（正调节），抑制性受体（负调节）】 免疫细胞的调节作用 1 T细胞调节 2 B细胞调节 3 NK细胞与巨噬细胞调节 整体水平的调节作用 1 神经和内分泌系统对免疫系统的调节 2 免疫系统对神经系统和内分泌系统的影响 T细胞的调节 T细胞在免疫调节中决定免疫应答的类型，协调细胞免疫和体液免疫之间的关系。 Th细胞的调节 分类：Th0细胞、Th1细胞和Th2细胞 Th0细胞为Th1细胞和Th2细胞的前体细胞； Th1细胞辅助细胞免疫应答； Th2细胞辅助体液免疫应答。 免疫抑制剂的研究 免疫抑制剂 免疫抑制剂是指能够抑制免疫反应的药物，它能抑制淋巴细胞增殖、分化和影响淋巴细胞的功能。 选择性免疫抑制剂是指对淋巴细胞有专一性作用，对红细胞生成几乎没有影响，无毒性或毒性极微，不损害宿主对细菌和真菌的感染防御机制。 免疫抑制剂应用于器官移植中的抗排斥作用和治疗自身免疫性疾病如风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、霉菌病、炎性肠病、自身免疫溶血性贫血等。 免疫抑制剂作用机理 第1代：以皮质激素、硫唑嘌呤、抗淋巴细胞球蛋白(ALG)为代表，主要作用为溶解免疫活性细胞，阻断细胞的分化，其特点为非特异性、广泛的免疫抑制。 第2代：以环孢素A(CsA)和FK506为代表，主要阻断免疫活性细胞的白细胞介素2(IL-2)的效应环节，因其以淋巴细胞为主而具有相对特异性。 第3代：以单克隆抗体、雷帕霉素、霉酚酸脂为代表，其作用于抗原呈递和分子间的相互作用，与第2代制剂有协同作用。 第4代：以抗IL-2受体单克隆抗体、FTY20等为代表，主要针对改变cytokine环境，如抑制TH1，增强TH2。 作用机理1 环孢素和FK-506 通过与胞浆内可溶性蛋白质亲免素受体结合而发挥作用的。亲免素受体有3个亚型，分别为Cyclophilin, FKBP-12,Pin1, 它们都具有旋折酶（PPIase，羟脯氨酸顺反异构酶）的活性。 其中FK-506与FKBP12结合，形成药物受体复合物，抑制T细胞内钙调素依赖的磷酸酶（Calcineurin）活性，导致T细胞IL-2基因转录受抑制，IL-2分泌减少，造成免疫抑制。 作用机理2 霉酚酸酯（MPA） 高选择性、非竞争性、可逆性的次黄嘌呤核苷磷酸脱氢酶（IMPDH）抑制剂，可抑制鸟嘌呤核苷酸的经典合成途径。 人体内淋巴细胞与其他细胞不同，不能利用嘌呤补救途径合成嘌呤，因此 MPA可以高度选择性的抑制淋巴细胞活化，抑制机体的细胞免疫和体液免疫功能。同时在淋巴细胞激活过程中，MPA通过减少GTP和GDP岩藻糖、GDP-甘露糖含量抑制淋巴细胞表面粘附分子的糖基化，从而抑制激活的淋巴细胞与上皮细胞或靶细胞粘附而杀伤靶细胞。 免疫抑制剂筛选 传统的筛选方法 MLR混合淋巴细胞反应 T细胞抑制活性 NK细胞抑制活性 新的筛选方法 抑制Calcireurin活性方法（Dibefurin） P56酪氨酸蛋白激酶活性方法（Lymphostin） 抑制活化T细胞的核因子的NFAT-68和NFAT-133 免疫抑制剂筛选 含RBP基因的酵母筛选模型 用含有RBP(雷帕霉素结合蛋白，Rapamycin Binding Protein, RBP)基因的啤酒酵母菌RS188N及其变株RS188N Δrbp：：：LEU(RBP基因片段由于被亮氨酸基因嵌入从而阻断该基因编码RBP的产生)的筛选模型，