3.1《菊花的组织培养》.ppt

（四）培养 1、愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养 继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为1－1.5cm时，就可以进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养 2、愈伤组织的继代培养 在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色 3、试管苗的培养 当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的见光培养 （五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 （六）栽培 3、移栽 珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培 幼苗长壮后，移栽到土壤中 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花 三、课题延伸 1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季。 作业：P36　 1、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。 2、在选取菊花茎段是，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？ 专题3 植物组织培养技术 植物组织培养：是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 一、基础知识 课题1： 菊花的组织培养 1、植物的组织培养 （1）细胞的分化 ①概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 ②过程： 如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统 ③ 特点： （2）稳定性： （3）不可逆性 （1）持久性： 是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度 细胞分化方向是已定的，一般是不可逆转的 细胞分化过程中，遗传物质是稳定不变的 ⑤原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果 ④结果： 形成不同的组织和器官 （2）细胞的全能性 ①定义： 高度分化的细胞，仍具有发育为完整个体的潜能的特性 ②原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因 高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质 已分化的植物细胞，仍具有全能性 ③实例 受精卵生殖细胞体细胞 ④全能性的比较: （3）植物组织培养 细胞离体 ①必要条件： 一定的营养物质、激素和其他外界条件（适宜的温度、PH等） ②原理: 细胞的全能性 外植体：从活植物体上切下来用于离体培养的细胞、组织或器官。 ③相关概念: 脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 再分化：脱分化形成的愈伤组织继续进行培养，又重新分化成根或芽等器官的过程。 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞 人参的愈伤组织 菠萝的愈伤组织 植物组织培养的基本过程 再分化 去（脱）分化 2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果。 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。 （2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基。 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、微量元素: B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、 I、Co等 ① 无机营养： ② 有机营养： 维生素、氨基酸、肌醇、蔗糖、有机添加剂等 ③ 植物生长调节物质：各种激素类物质 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植