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典当行三查七对五报告(共10篇)
氨基酸的紫外-可见光谱分析 Ultraviolet-VisibleSpectroscopyAnalysisofAminoAcids姓名:吉武良院系:化院20系学号:PB 摘要:紫外-可见吸收光谱是基于分子电子跃迁产生吸收光谱进行分析测定的仪器分析方法,广泛应用于具有生色团或共轭结构有机物的定性和定量分析,也可以鉴定电荷转移和配位体场无机化合物。本实验以三种芳香氨基酸,即苯丙氨酸,酪氨酸,色氨酸的分析为例,学习紫外-可见光谱分析的原理,操作以及定性和定量分析方法。 关键词:紫外-可见吸收光谱氨基酸苯丙氨酸酪氨酸色氨酸定性定量Abstract:Ultraviolet-visiblespectroscopyanalysisisanabsorptionspectroscopybasedonmolecularelectronicisusedtoqualitativelyandquantitativelyanalyzeconjugatedorganics,aswellasinorganiccompoundswithelectronictransitionsortransitionmetalions.ThisexperimentisdesignedintheexampleofUV-Visanalysisofaromaticaminoacids,thatisPhenylalanine,TyrosineandTryptophan,tolearnprincipleofUV-visanalysis,operationofUV-Visspectrometerandapproachtoqualitativelyandquantitativelyanalyze. Keywords:Ultraviolet-visiblespectroscopyanalysis,Phenylalanine,TyrosineTryptophan,Aminoacid,Qualitative,Quantitative. 一、前言 紫外-可见分光光度法属于吸收光谱法,分子中的电子总是处在某一种运动状态中,每一种状态都具有一定的能量,属于一定的能级。电子由于受到光、热、电等的激发,从一个能级转移到另一个能级,称为跃迁。当这些电子吸收了外来辐射的能量,就从一个能量较低的能级跃迁到另一个能量较高的能级。(如图1为电子跃迁示意图)。 物质对不同波长的光线具有不同的吸收能力,如果改变通过某一吸收物质的入射光的波长,并纪录该物质在每一波长处的吸光度,然后以波长为横坐标,以吸光度为纵坐标作图,这样得到的谱图为该物质的吸收光谱或吸收曲线。当一定波长的光通过某物质的溶液时,入射光强度I0与透过光强度It之比的对数与该物质的浓度c及厚度b成正比。其数学表达式为: A?logI0??logT?kbcIt 式为Lambert-Beer定律,是分光光度法定量分析的基础,其中T为透光率(透射比)。 Figure1:电子跃迁示意图 物质的吸收光谱反映了它在不同的光谱区域内吸收能力的分布情况,不同的物质,由于分子结构不同,吸收光谱也不同,可以从波形、波峰的强度、位置及其数目反映出来,因此,吸收光谱带有分子结构与组成的信息。 紫外-可见分光光度计是分析的仪器,主要分为单光束和双光束,单波长和双波长光度计。以下为单波长双光束分光光度计的工作原理示意图。 Figure2:紫外-可见分光光度计原理图 氨基酸类物质的一个重要光学性质是对光有吸收作用。20种氨基酸在可见光区域均无光吸收,在远紫外区均有光吸收,在紫外区只有三种AA有光吸收能力,这三种氨基酸分别是苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸,因为它们的结构均含有含有苯环共轭双键系统。苯丙氨酸最大吸收波长在259nm、酪氨酸在278nm、色氨酸在279nm,蛋白质一般都含有这三种氨基酸残基,所以其最大光吸收在大约280nm波长处,因此能利用分光光度法很方便的测定蛋白质的含量。 本实验将对苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸三种氨基酸进行光谱测定及相关定量测定。三种氨基酸结构如下: Figure3:芳香族氨基酸结构 二、实验部分 试剂 标准溶液(a):g/L的苯丙氨酸溶液; 标准溶液(b):g/L的酪氨酸溶液; 标准溶液(c):g/L的酪氨酸溶液;色氨酸待测样。 仪器: UV-VIS-NIRSpectrophotometer(UV-3600,SHIMADZU); 、、移液管若干; 10mL带塞比色管若干。 实验步骤 分别移取标准溶液(a)、标准溶液(b)和标准溶液(c)标准溶液于10mL比色管中,用去离子水稀释、定容、摇匀,待用。 分别移取、、、
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