课件：第章下化学物质的发育毒性和致畸作用.ppt

THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 正式试验最少应设3个剂量组，另设对照组。 高剂量组——该剂量一般不超过LD50的1/5-1/3，应引起母体轻度中毒，即进食量减少、体重减轻、死亡不超过10%； 低剂量组——可以为LD50的1/100-l/30，不应观察到任何中毒症状； 中剂量组——可以允许母体出现某些极轻微中毒症状，其剂量与高剂量和低剂量成等比级数关系。 如果已掌握或能估计人体实际接触量，也可将实际接触量作为低剂量，并以其10倍左右为最高剂量。 急性毒性较强的受试物，所采用剂量应稍低，反之可较高。 最高剂量组能引起母体轻度中毒，仍未观察到致畸作用，则可确认为该因素不具有致畸作用。 3、动物交配处理 将性成熟雌雄动物按雌雄1:1或2:1的比例同笼交配。每日将已确定受孕雌鼠随机分入各剂量组和对照组。确定受孕方法是阴栓检查或阴道涤片精子检查，出现阴栓或精子之日即为受孕“0”日，也有人作为第l日。 接触受试物的方式与途径应与人体实际接触情况一致。大鼠和小鼠一般可自受孕后第5天开始接触受试物，每日一次，持续到第15天。如研究器官易感性，则应在上述期间增加动物组数，将受试物每日分别给予不同组的动物，根据畸形出现的情况，确定受试物的敏感时间和靶器官。 试验期间每天称取母鼠体重。根据体重增长，随时调整剂量，观察受孕动物的妊娠情况和胚胎发育情况。受孕动物的体重持续增长，表示妊娠过程及胚胎发育正常。 4、胎仔检查 自然分娩前1～2日将受孕动物处死剖腹，取出子宫及活产胎仔，记录死胎及吸收胎。一般大鼠在受孕后第19～20天，小鼠第18～19天，家兔在第29天。胎仔在临近出生期间，发育进展极为迅速。相差半日，发育情况即有显著差异，骨骼发育尤为显著。 孕鼠处死后，从子宫顶端依次取出其中活产幼仔、死胎以及吸收胎，并记录编号。 大鼠和家兔还应取出卵巢，记录黄体数用来代表排卵数。 活产胎仔取出后，先检查性别，逐只称重，并按窝计算平均体重，然后进行畸形检查。 为保证哺乳机会，一般主张每窝保留8只幼仔，并尽量雌雄数量相等。 畸形检查 ①外观畸形肉眼检查，例如露脑； ②肉眼检查内脏及软组织畸形，如腭裂； ③骨骼畸形检查，例如颅顶骨缺损等。 动物试验的缺点： 1、动物实验结果外推到人的不肯定性： 由于致畸作用存在种属差异和品系差异，故对一种受试物须多次重复同一实验，均出现一定畸胎发生率，才能认为畸胎发生与该受试物有关。 至少应能在两种以上实验动物的实验中都显示肯定能够的致畸作用才能可靠的推导于人。 但只要受试物在一种动物具有致畸作用，就应警惕它对人类具有的潜在危险性。 2、动物高剂量接触与人类实际低剂量接触的区别 阿司匹林和磺胺类药物对大鼠有致畸作用，但这些药物人类已长期使用，并未发现肯定的致畸作用，可能是人所利用的剂量未达到可引发致畸的程度。 维生素A常用作致畸的阳性对照物，给大鼠1000mg/kg剂量可引发畸胎，按此剂量推算，50kg体重的人每天应服用50ml的鱼肝油，才会产生致畸作用，而人类很难摄取如此大量的鱼肝油，故到目前为止，维生素A并未被列为人类的致畸物。 一定要考虑人类的实际接触剂量。此外更要重视流行病学的调查，设法收集接触者的流行病学及临床资料，只有将动物实验结果与流行病学调查资料结合起来，进行综合分析，才能得出正确的结论。 对大多数化学物质来说，三段生殖毒性试验设计通常是最适当的，关键因素是各个生殖阶段之间不得有间隔，即在三个有关联的阶段接触受试物的时期至少有一天的重叠，并能直接或间接地评价生殖过程的所有阶段。 生殖发育过程可分为6个阶段 A. 从交配前到受孕：检查成年雄性和雌性生殖功能、配子的发育与成熟、交配行为、受精。 B.从受孕到着床：检查成年雌性生殖功能、胚胎着床前发育、着床。 C.从着床到硬腭闭合：检查成年雌性生殖功能、胚体发育、主要器官形成。 D.从硬腭闭合到妊娠结束：检查成年雌性生殖功能、胚体的发育与生长、器官的发育与生长。 E.从出生到断乳：检查成年雌性生殖功能、新生仔对宫外生活的适应性、断乳前的发育与生长。 F.从断乳到性成熟：检查断乳后的发育与生长，对独立生活的适应、达到完全的性功能。 三段生殖毒性试验 生育力和早期胚胎发育毒性试验（一般生殖毒性试验） 胚体-胎体毒性试验(致畸试验) 出生前后发育毒性试验(围生期毒性试验) 三段生殖试验图解 Ⅰ. 生育力和早期胚胎发育毒性试验（一般生殖毒性试验） Ⅱ. 胚体-胎体毒性试验（致畸试验） Ⅲ. 出生前后发育毒性试验（围产期毒性试