第八章 血液及血液成分的制备和保存.ppt

2）糖液洗涤法 甘油化： 向一单位全血分离后余下100-120ml 红细胞中缓慢加入等容积的甘油化试剂，大约10分钟，并不断搅拌，室温平衡半小时后放入-80 ℃低温冰箱保存； 解冻：同盐水洗涤法； 洗涤脱甘油：边搅拌边加入与甘油化红细胞等体积的50% 的葡萄糖液，再加入蔗糖溶液，等待红细胞聚集沉淀后去除上清液。再用10% 蔗糖溶液500ml 反复洗涤两次，除去上清液。加入生理盐水混匀，离心除去上清液。再加入生理盐水100ml 制成红细胞悬液。 (2)低浓度甘油超速冷冻法 甘油浓度在20% 左右，将红细胞快速（1.5-2.0分钟）冰冻并保存在-196 ℃液氮中，输注前从液氮中取出，立即在45℃水浴中震荡快速解冻并进行洗涤 ㈢保存 冰冻红细胞最大的有点可长期保存，高浓度甘油的红细胞可以保存3年，低浓度甘油超速冷冻的红细胞可以保存10年。高浓度甘油冷冻的红细胞在-80保存，超低温冰箱即可保存。 解冻后的红细胞保存在温度4℃±2℃ 自制备后尽快输注，最好在6小时之内输用，保存不超过24小时 六、年轻红细胞 ㈠概念 年轻红细胞是一种具有较多的网织红细胞、酶活性相对增高、平均细胞年龄较小的红细胞成分。大多用血液细胞分离机制备。年轻红细胞存活期明显长于成熟红细胞，半存活期为44.9天，而成熟红细胞仅为29天 保存 输入体内可相对延长存活期，所以对长期依赖输血的贫血患者，重型珠蛋白生成障碍性贫血患者疗效较好。 保存同其他红细胞成分 七、辐照红细胞 制备 用射线照射灭活活性淋巴细胞的红细胞制剂，用来预防TA-GVHD的发生，血液制剂的最佳辐照量是完全消除供血者淋巴细胞的有丝分裂能力而不破坏其他血液细胞功能。我国要求的照射剂量为25Gy. 保存 美国FDA规定红细胞辐照后保存不超过28天，最好尽快输注，输后体内回复率应﹥75%。欧洲会议推荐红细胞的辐照应在采血后14天内进行，并且辐照后红细胞的保存时间应在辐照后14天内 第三节 血小板的制备和保存 手工法 制备出的血小板为浓缩血小板并可进行多人分汇集保存和输注，一般从献血员采集200ml或400ml全血采用离心分离后手工挤压分离出血小板制剂。目前我国规定手工法由200 ml全血制备浓缩血小板为1u,所含血小板数≥2.0×1010 机器单采法 用血细胞分离机从单一献血者体内进行直接采集，制备的血小板为单采血小板，可从单一献血者体内采集1或2个成人治疗剂量的血小板。我国规定一个治疗单位（剂量）为≥2.5×1011 无论哪种血小板均可进行进一步处理，已获得更为高质量和安全的血小板制剂，如去除白细胞，病毒灭活，辐照等处理，可得到相应的血小板制剂 一 浓缩血小板（PC ) ㈠概念 浓缩血小板（PC)制剂 是将室温保存的多联袋内的全血，于采血后在一定时间内（通常6小时内）在20～24℃的全封闭条件下将血小板分离出来并悬浮在血浆内制成的成分血，已有研究表明，全血采集后室温（ 20～24℃）放置后再制备血小板，可得到更高产率。 ㈡制备方法 浓缩血小板（PC)制剂有三种模式： 1、富血小板血浆法（PRP)，新鲜采集的全血于4～6小时内分离PRP，再进一步分离为浓缩血小板（PC） 2、白膜法，从白膜中经第二次离心后提取血小板，将5～6袋同型白膜和血浆用无菌接驳机串联起来，并过滤后汇集成一单位浓缩血小板。 3、机分法，利用血细胞分离机进行分离 ⒈多联袋制备浓缩血小板Ⅰ(PRP法) 1）全血采集于三联袋或四联袋主袋内； 2）采后 4-6小时内，于22℃±2℃存放或轻度离心，以离心力1100×g离心57分钟或700 ×g离心10分钟，使红细胞下沉，大部分血小板保留于血浆中为PRP层； 3）将上层PRP分入第二转移袋内 4）把第三袋内的红细胞保存液加入主袋压积红细胞内，用热合机热合切断主袋与第3 转移袋之间的连接塑料管。在主袋与第2血袋间塑料管内留取红细胞与血浆为血样品管； 5）把第2PRP 袋协同第三转移袋重度离心，温度22℃±2℃，以离心力4650×g，离心6分钟，或3400×g，离心10分钟，使血小板下沉于底部形成沉淀； 6）分离上层少血小板血浆进入第3 转移袋内，留下20-30ml(1单位全血所分出的血小板）或50-70ml （2单位全血所分血小板）血浆于第二血小板袋内； 7）在22℃±2℃静置1～2小时，使血小板自然解聚重新悬浮形成悬液，制备的血小板应放入22℃±2℃血小板振动器保存。 ⒉多联袋制备浓缩血小板Ⅱ（白膜法） 1）全血采集于四联袋主袋内 2）将采血后的四联袋，置22℃±2℃温度离心，离心