肌卫星细胞失神经骨骼肌种植治疗肌萎缩的实验研究-骨外科学专业论文.docxVIP

肌卫星细胞失神经骨骼肌种植治疗 肌卫星细胞失神经骨骼肌种植治疗 肌萎缩的实验研究 摘要 目的：观察骨骼肌卫星细胞种植对在体失神经骨骼肌萎缩的影响。研究肌 卫星细胞对萎缩肌肉的作用，为I临床提高治疗失神经肌萎缩的疗效提供实 验依据。 方法：采用I型胶原酶和胰蛋白酶两步消化法获取大鼠骨骼肌卫星细胞， 不连续密度梯度离心法纯化后，体外原代培养，并运用频繁传代的方法获 取足量单个肌卫星细胞。利用免疫细胞化学染色对所获取的细胞进行鉴定， 为移植做准备。取成年SD大鼠共32只雌雄不限，随机分为2组，对照组 与实验组各16只，两组均采用切断大鼠右后肢坐骨神经造成lcm神经缺损， 形成失神经支配腓肠肌的动物模型。实验组与对照组分别取肌卫星细胞悬 液，生理盐水各0．2ml，注入失神经支配腓肠肌内，移植前一天以0．02％浓 度4 7—6一二脒基一2一苯吲哚(DAPI)荧光标记肌卫星细胞过夜。实验 后2周、8周时取双侧腓肠肌测定肌湿重，然后行肌动蛋白免疫组织化学染 色及HE染色，并作图像分析测定肌纤维横截面积及肌动蛋白的表达量，数 据经SPSSl0．0软件处理，进行两组样本均数比较t检验。 结果：肌卫星细胞移植处，观察到带荧光的细胞核及肌纤维。肌卫星细胞 移植组2周时，失神经支配腓肠肌湿重残存率为(75．5823±7．3981)％较对 照组(55．53的±11．5228)％差异有显著性(P0．01)；失