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第九章 色谱法;本章基本要求;;VOCs 混标的气相色谱图;气相色谱仪;;GC气路系统;高压液相色谱仪;离子色谱仪;§9.1 概述;2.色谱法分类根据流动相和固定相物理状态分:;(2) 根据分离过程中固定相的形状分:A、柱色谱法:填充柱色谱、毛细管色谱B、平面色谱:纸色谱、薄层色谱(3) 根据分离过程的原理分：吸附色谱、分配色谱、离子色谱、凝胶色谱。;填充柱和毛细管柱分离硝基苯效果比较图;9.1.2 气相色谱法的特点;9.1.3 气相色谱分析流程;气相色谱流程：;9.1.4 分配系数（partition coefficient）;分配系数 K 的讨论;容量因子（capacity factor） k;K与 k 的关系：;§9.2 气相色谱分析理论基础;1.基线（base line）;(2) 用体积表示的保留值;3. 区域宽度（色谱峰宽度）;9.2.2 色谱柱效能;1. 塔板理论——柱分离效能指标;;有效塔板数和有效塔板高度:;塔板理论的特点和不足：;2. 速率理论——影响柱效能的因素;(1) A─涡流扩散项;(2) B/u —分子扩散项;(3) C ·u —传质阻力项;速率理论的要点:;3. 分离度（resolution）;色谱分离中的四种情况的讨论：;分离度的表达式：;令Wb(2)=Wb(1)=Wb（相邻两峰的峰底宽近似相等）， 引入相对保留值和塔板数，可导出下式：;例题：;;§9.3 气相色谱分离操作条件的选择;2. 载气流速的选择;9.3.2 柱温的选择;醇系物GC分析 (a)175 oC等温 (b)程序升温;9.3.3 柱长和柱内径的选择;9.3.4 进样量和进样器;9.3.5 气化温度的选择;§9.4 气相色谱检测器;响应值（或灵敏度）S ：;9.4.2 热导池检测器;2.检测原理;进样后:;3. 影响热导检测器灵敏度的因素;表1 各种气体的热导系数（单位：J/cm· °C ·s ）;9.4.3 氢火焰离子化检测器;2.氢焰检测器的结构;3. 氢焰检测器的原理;4. 操作条件的选择;9.4.4 其他检测器;;§9.5 气相色谱定性/定量分析;2.利用相对保留值定性 3.应用经验规律定性 4.利用保留指数定性;;二、定量校正因子;三、几种常用定量方法;2. 外标法;3. 内标法;(1) 准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不大。 (2) 不适合大批量试样的快速分析。 (3)若将内标法中的试样取样量和内标物加入量固定，则：;; 高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）是在经典液相色谱法基础上发展起来的一种新型分离、分析技术。经典液相色谱法由于使用粗颗粒的固定相，填充不均匀，依靠重力使流动相流动，因此分析速度慢，分离效率低。新型高效的固定相、高压输液泵、梯度洗脱技术以及各种高灵敏度的检测器相继发明，高效液相色谱法迅速发展起来。 ;HLPC与经典液相色谱和气相的比较;高效液相色谱与气相色谱比较;按固定 相分类;详细分类图;一、高效液相色谱仪;;1、高压输液系统;2、分离和进样系统 ;3、检测系统;（2）紫外光度检测器;（2）紫外光度检测器;紫外光度检测器;（3）荧光检测器;（3）荧光检测器(fluorescence detector；FD);二、高效液相色谱分析方法 ;影响HPLC色谱峰扩展及分离的因素主要是传质阻力。 (一) 减小柱内展宽，提高柱效 l. 固定相：①粒度小，均匀，以减小涡流扩散和流动相传质阻力；②改进结构，尽可能采用大孔径和浅孔道的表面多孔型载体或全多孔微粒型载体，减少滞留流动相传质阻力。 2. 流动相：选用低粘度的流动相，有利于增大组分在溶剂中的扩散系数Dm，减少传质阻力。 3. 流速：从H-U曲线可知，HPLC的最佳流速在流速很小处，减少流速有利于提高柱效，但在实践中为加快分析速度，???采用比最佳流速高数倍的流速。 4. 柱温：适当提高柱温，可降低流动相粘度，减少传质阻力，但柱温升高将使分辨率降低，柱寿命短，易产生气泡，一般在室温下进行。;(二) 柱外展宽;总结：HPLC与GC差别;2．流动相差别 GC：流动相为惰性气体 组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用 HPLC：流动相为液体 流动相与组分间有亲合作用力，为提高柱的选择性、 改善分离度增加了因素，对分离起很大作用 流动相种类较多，选择余地广 流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用 选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相 可以增大分离选择性;9.7离子交换色谱及离子色谱法;一.离子交换色谱;;2. 固定相;3. 流动相;二、离子色谱;作业3;