甲壳低聚糖抗微生物活性的研究-病原生物学专业论文.docxVIP

刘碧源 刘碧源 南华大学2003届硕士学位论文 甲壳低聚糖抗微生物活性的研究 研究生：刘碧源 导师：高仕瑛教授 专业：病原生物学 摘要 目的：研究用过氧化氢氧化法制备的甲壳低聚糖及甲壳低聚糖碘液的抗微生物 活性，为其实际应用提供理论依据。 方法：1．甲壳低聚糖抗微生物活性的测定：用涂布法和滴注法分别测定不同浓度 的甲壳低聚糖溶液(4％、2％、1％、O．5％)对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆 菌芽胞、白假丝酵母菌的抑制作用，以及培养时间对其抑菌性能的影响，并测定其对 供试菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。2．甲壳低聚糖与壳聚糖抗微 生物活性的比较：用琼脂稀释法测定不同浓度的甲壳低聚糖和壳聚糖溶液对四种供试 菌的抑制作用，并研究了pH值对其抗菌性的影响；用酶联免疫吸附测定(ELISA)法 检测了甲壳低聚糖和壳聚糖对乙型肝炎病毒表面抗原与e抗原的破坏作用。3．甲壳低聚 糖碘液抗微生物活性的研究：应用消毒学定量悬浮实验测定甲壳低聚糖碘液(含碘 0．5％)对四种供试菌的杀菌效果。 结果：1．涂布法和滴注法测定甲壳低聚糖的抗菌效果基本一致。甲壳低聚糖对金 黄色葡萄球菌的抑制作用最强，0．5％的浓度可完全抑制其生长；大肠埃希菌次之，需 1％的浓度；枯草杆菌芽胞需2％；对白假丝酵母菌的作用最弱，需4％的浓度。且随着 甲壳低聚糖浓度的增加，抗菌活性增强。2．壳聚糖的抗菌活性明显高于甲壳低聚糖。 浓度为0．5％时，壳聚糖对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌率是100％，而甲壳低聚 糖的相应抑菌率分别为64％和59％。浓度为1％时对枯草杆菌芽胞的抑制率壳聚糖可达 到100％，甲壳低聚糖只有77．78％；浓度为2％时壳聚糖可完全抑制白假丝酵母菌生长， 刘碧源 刘碧源 南华大学2003届硕士学位论文 甲壳低聚糖抑菌率仅有48．5％。甲壳低聚糖与壳聚糖均在偏酸性条件下显示抗菌活性。 壳聚糖的最适pH值范围为4．O一7．0，甲壳低聚糖为4．0-6．0。当浓度在0．25％至2％的 范围时甲壳低聚糖和壳聚糖对乙型肝炎病毒表面抗原与e抗原均无破坏作用。3．定量 悬浮试验表明，甲壳低聚糖碘液(含碘O，5％)浓度为1：32对悬液中金黄色葡萄球菌 作用5min，杀灭率为100％；而对大肠埃希菌100％的杀灭需l：16的浓度。甲壳低聚 糖碘液的原液对枯草杆菌芽胞杀灭率为99．44％，白假丝酵母菌只有14．35％。对供试菌 的杀菌作用随浓度的增高而增强。 结论：1．甲壳低聚糖对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽胞、白假丝 酵母菌均有抑制作用，对革兰阳性菌的抑制作用强于革兰阴性菌及酵母菌；2．壳聚糖 的抗菌活性优于甲壳低聚糖的抗菌活性，甲壳低聚糖和壳聚糖发挥抗菌作用的有效pH 值范围分别为4．0．6．0和4．0．7．O； 3．甲壳低聚糖和壳聚糖在体外对乙型肝炎病毒表面 抗原与e抗原均没有破坏作用：4．甲壳低聚糖碘液对细菌繁殖体及枯草杆菌芽胞有较强 的杀灭作用，对自假丝酵母菌作用不明显。与络合碘比较，甲壳低聚糖碘液的抗菌活 性并未显示优越性。 关键词： 甲壳低聚糖； 甲壳低聚糖碘液； 壳聚糖； 抗微生物活性 刘碧源 刘碧源 南华大学2003届硕士学位论文 Study on the Antimicrobial Activity of Chitooligosaccharide Abstract objective：The purpose of this study was to examine the antimicrobial activity of chitooligosaccharide and chitooligosaccharide-iodine produced by improved H202 degradation in vitro．It would provide scientific basis for further research and application ofchitooligosaccharide． Methods：1．Spreading inoculation and dropping inoculation were used to determine the antimicrobial activity of the chitooligosaeeharide with different concentrations against Staphylococcus aureus，Escherichia coli，Bacillus subtflis，Candida albicans．The effects of incubation lime，concentration on the inhibitory act