一株产海藻糖合成酶极地细菌的鉴定.pdf

　第 34 卷 第 4 期 工 业 微 生 物 　Vol. 34 No. 4 　 　2004 年 12 月 Industrial Microbiology Dec. 2004 一株产海藻糖合成酶极地细菌的鉴定 1 1 1 2 2 段作营 , 　徐 　骥 , 　毛忠贵 , 　陈 　波 , 　俞 　勇 ( 1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 ,无锡 214036 ;2. 中国极地研究中心 ,上海 200129) 摘　要 　　从来源于极地的微生物中筛选得到一株产海藻糖合成酶的耐冷细菌 S1 ,通过形态特 ( 征、培养特征、生理生化特征及 16S rRNA 基因序列分析 ,初步鉴定该菌为恶臭假单胞菌 Pseudo monas putida) 。 关键词 : 海藻糖合成酶 ; 　菌种鉴定 ; 　恶臭假单胞菌 αα 行结晶紫单染色、革兰氏染色、芽孢染色 ,用光学显 　　海藻糖是由两个吡喃环葡萄糖分子以 , - 1 , 1 键构成的的非还原性双糖。作为对生命体和生物 微镜观察其菌体形态[ 6 ,7 ] 。同时用上述培养物 ,采 大分子的一种非特异性保护剂 ,在食品工业、农业、 用电子显微镜观察菌体形态、鞭毛着生情况和细胞 医药工业、日用化工以及分子生物学等领域有广泛 表面结构。 的应用前景。目前海藻糖生产方法主要为酶法转 1. 3 　培养特征观察 化 ,海藻糖合成酶是其中最有应用价值的酶之一 ,它 　　在牛肉膏琼脂、营养琼脂、LB 琼脂、蛋白胨酵母 能以麦芽糖为底物 ,将麦芽糖直接转化为海藻糖 ,是 膏琼脂等 4 种培养基上 ,30 ℃培养 48h 后观察菌落 一类非磷酸化酶[ 1 ] 。 的颜色和形状[ 6 ,7 ] 。 　　在不同的生物中所进行的研究表明 ,海藻糖是 1. 4 　生理生化试验 生物体在极端环境下为抵抗不良的生存环境而产生 　　在营养琼脂上 30 ℃活化培养 24h 后 ,按文献所 的应激产物[ 2 ] 。国内外对海藻糖合成酶的研究主要 述方法[ 6 ,7 ] ,对该培养物分别进行葡萄糖氧化发酵 ( ) 集中在常温菌和嗜热菌中 ,对极端低温环境中微生 休和利夫森培养基 、乙醇氧化、脲酶、接触酶、精氨 [ 3 ] ( ) 物产生的海藻糖合成酶的研究报道较少 。极地微 酸双水解酶、脂酶 Tween80 测定、卵磷脂水解、还 [ 4 ]