中药化学试验技术.doc

第一章 绪论 第一节 中药化学研究成果及应用 第二节 中药化学成分的预试验 系统预试法——应用一些简单的定性试验，对中药中所含各类化学成分作全面检查。 单项预试法——根据需要，有重点的检查某类成分或某药效成分。 方法：试管反应+薄层层析检查 预试溶液的制备 水提取液——糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质…… 乙醇提取液——酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体…… 5%HCl-乙醇提取液——生物碱 石油醚提取液——甾体、萜类、脂肪油…… 各类成分的检查 生物碱 （1）沉淀反应——碘化汞钾试剂 →白色或浅黄色沉淀 碘化铋钾试剂 →橘红色沉淀 碘—碘化钾试剂 →浅棕或暗棕色沉淀 硅钨酸试剂 →浅黄或黄棕色沉淀 磷钨酸试剂 →浅黄色沉淀 磷钼酸试剂 →白色或淡黄色沉淀 苦味酸试剂 →黄色结晶或非结晶形沉淀 鞣酸试剂 →棕黄色沉淀 氯化金试剂 →黄色结晶 氯化铂试剂 →白色结晶 雷氏铵盐 →红色无定形沉淀 （2）薄层层析检查：吸附剂——碱性氧化铝（Ⅲ级，干法铺板） 硅胶G（稀碱湿法铺板） 展开剂——氯仿：甲醇 显色——UV；碘化铋钾 氨基酸、多肽、蛋白质 （1）加热沉淀试验：加热煮沸 →混浊或沉淀 （蛋白质） +5%H2SO4（不加热）→混浊或沉淀 （2）双缩脲反应：+40%NaOH，1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色（多肽、蛋白质） （3）茚三酮反应：+0.2%茚三酮试液 →蓝或蓝紫色（氨基酸、多肽、蛋白质） （4）吲哚醌反应：+吲哚醌试液 →各种颜色（氨基酸） （5）Millon反应：+Hg，H2NO2 →红色（蛋白质分子中有酪氨酸组成） （6）Hopkins-Cole反应：+乙醛酸，浓硫酸 →各色（蛋白质分子中有色氨酸组成） （7）氨基酸的薄层层析检查：吸附剂——硅胶G 展开剂—— n-BuOH，n-BuOH：HAc：H2O 显色剂——0.25%茚三酮试液 →紫红色斑点 有机酸 （1）PH试纸检查 （2）溴酚兰试液：喷洒→蓝色背景黄色斑点 （3）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或酸性氧化铝 展开剂—— C6H6：EtOH 显色剂——0.1%溴酚兰试液→黄色 酚类和鞣质 （1）FeCl3试剂：+1%FeCl3试液 →蓝、暗绿或蓝紫色 （2）三氯化铁-铁氰化钾试剂：喷洒→蓝色斑点 （3）香草醛-盐酸试剂：喷洒 →红色（间苯二酚、间苯三酚） （4）重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠 →红色 （5）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或纤维素 展开剂—— n-BuOH：HAc：H2O；15%HAc 显色剂——1% FeCl3试液 1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液 →蓝、绿或黑色 鞣质与酚类的区别：+明胶 —— 沉淀 上清液 +1%FeCl3试液 →蓝、暗绿或蓝紫色 糖和苷 （1）斐林试剂：+硫酸铜、酒石酸钾钠 —— 砖红色沉淀（还原糖） （—）+1%HCl +NaOH 沉淀（苷元） △30min 上清液（+）（多糖、苷） （2）Molish反应：+α-萘酚-浓硫酸 →紫红色环 （3）银镜反应：+0.1N硝酸银、5N氨水 →银褐色（还原糖） （4）薄层层析检查：：吸附剂——硅胶G或纤维素 展开剂—— n-BuOH：Pd：H2O；15%HAc 显色剂—— 苯胺-邻苯二甲酸 皂苷 （1）泡末试验：振摇 →大量持续性泡末 +0.1M HCl 二管泡末高度相同（三萜皂苷） +0.1M NaOH 碱管