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RNA聚合酶的核心酶与DNA链结合没有特异性. 延长是在核心酶、DNA、新生RNA的1个区域内进行 转录鼓泡:新生RNA链与模板链DNA形成一杂交RNA-DNA双螺旋链,约有12bp,含有核心酶、DNA模板链的解螺旋区域. 3. 转录链的终止 ? 许多转录过程可被基因末端的一段特异的碱基序列所终止。提供转录停止信号的DNA序列称为终止子(terminator)。 所有原核生物的终止子在终止点之前都有一个回文结构,它转录出来的RNA可以形成一个颈环式的发夹结构。 转录终止后,RNA聚合酶从DNA链上脱离下来。 发夹结构 十字形结构 ⑴ 不依赖于ρ的终止子(简单终止子) 简单终止子除具有发夹结构外,在终止点前有一寡聚U序列;回文对称区通常有一段富含GC的序列。 RNA的终止有两种方式: ⑵ 依赖ρ的终止子 依赖ρ的终止子,必需在ρ因子存在时,才发生终止作用。ρ因子又称终止因子,可水解三磷酸核苷。 回文序列 茎环结构 寡聚U序列 不依赖于ρ的终止子 依赖ρ的终止子 转录过程总结 转录的起始 ?识别转录启动子 ?对DNA进行解链、解旋 2. RNA链的延长 ?σ离开摸板链,核心酶在模板链上滑行 3. 转录的终止:终止子与终止因子 (三)、真核生物RNA合成的特点 1. 真核生物的RNA聚合酶 2. 真核细胞新生RNA的加工 ? RNA聚合酶合成的原初转录产物(primary transcript),要经过剪切、修饰、拼接等过程,才能转变成成熟的RNA分子,此过程称RNA转录后的加工。 真核生物mRNA的转录后加工 首、尾的修饰 5′-端帽子结构(m7G5′ppp5′G…) 3′-端多聚腺苷酸尾巴(polyA tail) 剪接 将hnRNA中的内含子除去,把外显子连接起来。 5′-端帽子结构 (m7G5’ppp5’G…) 内含子(Intron):那些从mRNA中消失的DNA序列 外显子(Exon) :那些在mRNA中出现并编码蛋白质的DNA序列 hnRNA 内含子 外显子 二、RNA的复制 有些RNA病毒,进入寄主细胞后,借助复制酶而进行RNA病毒的复制。 RNA病毒的RNA复制酶具有很强的模板特异性,只识别病毒自身的RNA,它以病毒RNA为模板,合成与模板性质相同的RNA。 1、正链RNA病毒(mRNA):噬菌体Qβ、灰质炎病毒等 进入寄主细胞后,利用寄主的翻译系统,首先合成复制酶及有关的蛋白质,然后进行病毒RNA的复制,最后由病毒RNA和蛋白质装配成病毒颗粒。 2、负链RNA病毒(带有复制酶):狂犬病毒等 此类病毒带有复制酶,侵入后,复制酶首先合成出正链RNA(mRNA),再以正链RNA为模板,合成负链RNA及蛋白质,然后装配。 RNA病毒的复制方式: 3、双链RNA病毒(带有复制酶):呼肠孤病毒等 以双链RNA为模板,在复制酶作用下先转录正链RNA(mRNA),从而翻译出蛋白质,然后合成负链RNA,形成双链RNA,再包装。 4、 反转录病毒(含反转录酶):白血病病毒、肉瘤病毒等致癌RNA病毒 正链RNA病毒,它们的复制需要经过DNA前病毒阶段。 ? 1. 光复活 ? 可见光(400~500 nm)可激活光裂合酶,此酶能分解由于紫外线形成的嘧啶二聚体。 2. 切除修复 切开 切除 修复 连接 5′ 3′外切酶 5′ 3′聚合酶 I p257 DNA聚合酶I 3. 重组修复 ? 切除修复发生在DNA复制之前,而当DNA发动复制时尚未修复的损伤部位,可以先复制,再重组修复。 4. SOS 修复 ? 避免差错的修复(error free repair):光复合、切除修复及重组修复对DNA损伤的修复都不导致DNA突变。 ? 倾向差错的修复(error prone repair):SOS修复。在DNA损伤后,DNA复制过程以脱氧核苷酸的聚合发生差错为代价,强行合成完整子代链的一种挽救性修复。 ? 光复合是利用光能,其余均利用ATP水解所释放的能量。 光复合和切除修复是修复模板链; 重组修复不是对损伤链直接修复,而是形成一条新的正常模板链。 ? SOS修复是导致突变的修复。 (三)、DNA突变 ? 不能修复的损伤或修复过程带来的差错,将引起DNA序列的永久性改变。 突变有三种形式: 置换、插入、缺失 第二节 RNA的生物合成 RNA的生物合成包括: 转录、RNA复制 转录 复制 ? 细胞内的各类RNA,包括mRNA、rRNA和tRNA,都是以DNA为模板,在RNA聚合酶的催化下合成的。 除逆转录病毒,其它的RNA病毒均以RNA为模板进行复制。 一、转录 ? 转录(t
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