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第十二章 环境监测中的微生物学方法第一节 水质的细菌学检测? 细菌总数 　 细菌总数是指将l mL水样（原水样或经稀释的水样）放在营养琼脂培养基上，于37培养24小时后，所生长的细菌菌落总数。 细菌总数的测定结果常用“cfu（菌落形成单位）/mL”或“个/mL”表示。 根据水样中的细菌总数，可将天然水体划分为几类：细菌总数101~102 cfu/mL，极清洁水；102~103 cfu/mL，清洁水；103~104 cfu/mL，不太清洁水；细菌总数104~105 cfu/mL，不清洁水；大于105 cfu/mL，极不清洁水。我国生活饮用水的国家标准（GB5749-1985）规定，生活饮用水中的细菌总数不得超过102 cfu/mL。 　 ? 腐生细菌数 　 自然水体中的腐生细菌数与有机物浓度成正比。因此，测得腐生细菌数或腐生细菌数与细菌总数的比值，即可推断水体的有机污染状况。 污水带的划分及其特征 污水带、特征 多污带 甲型中污带 乙型中污带 寡污带 腐生细菌数(个/mL) 数十万至数百万 数十万 数万 数十至数万 有机物 含大量有机物，主要是蛋白质和碳水化合物 主要是氨和氨基酸有物含量少 有机物含量极微 　 溶解氧 极低或几乎没有厌氧性 少量，半厌氧性 较多，需氧性 很多，需氧性 BOD5 非常高 较高 较低 很低 细菌数与腐生带的划分 样点号 细菌总数（百万个/mL） 腐生细菌数（千个/mL） 腐生菌数／总菌数（％） 腐生水 波动范围 平均 波动范围 平均 1 1.7～3.3 2.5 0.2～1.9 1.1 0.04 β-腐生带 2 1.6～3.4 2.4 0.9～3.0 2.0 0.08 β-腐生带 3 1.9～3.0 2.5 0.2～6.0 2.9 0.11 β-腐生带 4 4.3～5.0 4.6 9.7～16.5 13.3 0.30 α-腐生带 5 1.8～3.6 2.6 1.4～6.2 3.0 0.11 β-腐生带 6 3.5～6.8 4.8 59.2～175.2 116.0 2.42 多-腐生带 7 3.1～4.4 3.7 19.2～20.5 20.0 0.54 α-腐生带 8 2.0～2.7 2.3 10.3～36.2 20.2 0.84 α-腐生带 9 2.3～6.9 4.0 10.8～147.6 64.9 1.62 多-腐生带 　 ? 粪便污染指示菌 　 指示菌的理想条件 　 该菌大量存在于人粪中，数量高于病原菌； 在受人粪污染的水体中该菌易于检出，而未受人粪污染的水体中则无此菌； 在水体中该菌不会自行繁殖； 在水体中该菌的存活时间应长于致病菌，对氯与臭氧等消毒剂以及其它不良因素的抵抗力强于致病菌； 该菌检测方法简捷； 该菌适用于淡水、海水等各种水体。 　 较适宜的指示菌 大肠菌群（coliform group，简称coliform）、粪链球菌（Streptococcus faecalis）、产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）常用作粪污指标菌。 　 大肠菌群 大肠菌群的特征 大肠菌群：指一群需氧、兼性厌氧的，能在37°C培养24小时使乳糖发酵产酸产气的G－无芽孢杆菌。包括大肠埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属等。　 ?大肠菌群的鉴别　 菌? 名 吲哚试验 甲基红 试验 V.P.试验 柠檬酸钠 利用试验 氧化酶 试验 运动性 大肠埃希氏菌 + + - - - ± 弗氏柠檬酸杆菌 - + - + - + 产气肠杆菌 - - + + - + 克雷伯氏菌属 ± - + + - - 　 大肠菌群的检测 发酵法? 亦称多管发酵法或三管发酵法。以不同稀释度的样品分别接种乳糖胆盐发酵培养基（或其它乳糖发酵培养基）各数管。培养24小时后，观察培养结果。若观察到乳糖发酵产酸产气现象，称为阳性反应。记下阳性反应的试管数，查专用统计表求出大肠菌群的最可能数（MPN）。 滤膜法? 选用孔径为0.45~0.65mm的微孔滤膜，抽滤一定数量的水样，使水样中的细菌截留在滤膜上。然后，将滤膜贴在选择性培养基上，培养后直接计数滤膜上的大肠菌群菌落，算出每100 mL水样中含有的总大肠菌群数。? 大肠菌群指标 大肠菌群指数是指每升水中所含的大肠菌群细菌的个数。 大肠菌群值则是指检出一个大肠菌群细菌的最少水样量（毫升数）。　 　 我国饮用水的质量标准规定