第二章受精的机制.pptVIP

第二章 受精的机制 动物胚胎发育启动的两个主题 1 受精的完成 精子活化、趋向、穿卵膜、融合 受精的专一性与唯一性 2 胚胎期发育程序的启动 雌雄核融合、 细胞质重组、 受精卵代谢开始 精子和卵子的形态结构 趋化性（chemotaxis)是精子根据化学浓度直接向卵子运动的现象，与精子鞭毛的波状外形有关。 精子应答化学促活与趋化性因子被 认为是由受体调节的。 精子应答现象包括环核苷酸、胞内Na+、Ca2+的增加，pH值增高和H+、K+外向通透性增加。 二、精子获能（capacitation) 1951年美籍华裔科学家张明觉（M. C. Chang)和Austin分别发现了这一生理现象，1952年Austin将这一现象称为精子获能。 精子获能：人及哺乳动物精子在离开雄性生殖道时，还不能立即与卵子受精，它必须在雌性生殖道内接受雌性 分泌的物质,促使精子膜发生一系列变化，使精子产生生化和运动方向的改变，从而具备受精的能力。这种作用称为精子的获能。 获能的主要事件： 除去或改变精子质膜的稳定因子或保护物质，使精子质膜对特殊的受精环境非常敏感。 精子获能期间细胞内离子、新陈代谢、腺苷酸环化酶、顶体等均会发生变化。 从同一个体排出的精子并不是同时获能，原因在于： 精子膜结构内存在分子的多样性 附睾尾部的精子年龄不同 对影响它们成熟的环境反应性存在差异 三、顶体反应（acrosomal reaction) 顶体反应：当获能的精子与卵子相遇时，精子的顶体膜即与卵子表面融合，继而破裂形成许多小孔，顶体内含的酶（酸性水解酶）逐渐释放出来，通过酶解作用形成一个精子穿过的通道，精子顶体的这种变化称为顶体反应。是受精的开始. （一）无脊椎动物的顶体反应 在大多数海产无脊椎动物中，顶体反应包括两个事件： 顶体膜发生融合 顶体突起（acrosomal process)的形成 海胆精子的顶体反应 （二）哺乳动物的顶体反应 （三）精子的顶体酶及其穿透作用 精子的穿透作用是与顶体反应密切相关的。 通过顶体反应释放的物质中含有大量的水解酶。主要包括透明质酸酶、顶体素、蛋白酶和磷酸酶。其中以透明质酸酶和顶体素在受精中所起的作用最大，透明质酸酶能溶解卵泡细胞间的基质。 顶体酶的一个功能是在卵子的外围打一个洞，另外它与精卵的结合有关。 第二节 精卵结合与卵子的激活 一、配子识别与精卵的结合 距离识别：见于体外受精的水生生物。 接触识别：受精过程中，精子与滤泡细胞、透明带、卵质膜等在三个独立的水平上准确地相互作用。 （一）、海胆中精卵识别的特异性 海胆精子与卵子的特异性结合 （二）、哺乳动物的配子结合 哺乳动物精卵的特异性识别发生在卵细胞的透明带（zone pellucida，ZP)上。ZP上具有物种特异的精子结合蛋白。称为ZP1、ZP2、ZP3。 2、精子膜上的ZP受体 半乳糖结合蛋白（SP56)： Mr=56 kDa，可以与ZP3蛋白的半乳糖基特异性结合。 半乳糖基转移酶（GalTase)： Mr=60 kDa，它可识别ZP3糖蛋白上的N-乙酰氨基葡萄糖，它镶嵌分布在顶体上方的精子细胞膜中，与N-乙酰氨基葡萄糖的结合位置暴露在膜外。 透明带受体激酶（ZRK/p95)： Mr=95 kDa的跨膜蛋白，它有2个功能域。在细胞外的区域可以与ZP3发生特异识别结合，细胞内区域具有酪氨酸蛋白激酶活性。 小鼠精子与卵细胞透明带结合 二、配子融合与阻止多精入卵 配子的融合是指精卵细胞膜的融合。 雌雄配子的融合在大多数卵子中被限定在特定的区域中。 融合是活动过程，需要许多融合蛋白的调节。 （二）阻碍多精入卵的机制 许多精子都可到达卵子的表面并与之吸附，但是通常只有一个精子能完成受精。 多精入卵受精将导致死亡和不正常发育。 精子为受精提供单倍体染色体和中心粒。 1、快速封闭反应（以海胆为例） 电位势改变产生快速阻止：海胆的第一个精子与卵质膜结合后的1-3s内，因钠离子的内流导致膜电位的迅速升高，使卵子上的精子结合蛋白失活，从而阻止其它精子与卵膜的结合。快速关闭反应维持时间大约1min。 海胆卵细胞膜电位的失常可造成多精受精现象 2、慢封闭反应（皮层反应） 皮质颗粒内含物： 蛋白水解酶：分离卵黄膜与卵细胞膜 粘多糖：吸水膨胀 过氧化物酶：催化蛋白铰链作用使受精 膜硬化 形成受精膜的慢速阻止：海胆卵受精后20-60s内，质膜下的皮质颗粒与质膜融合，释放其内含物形成受精膜，阻止其它精子的进入。 三、卵子的激活 未受精的卵子是惰性的，细胞的呼吸活动、RNA的转录和蛋白质的合成几乎都停止。 当精膜与卵膜融合后，经精子刺激，成熟卵从休眠状态进入活性状态，