慢性牙周炎EBV1及HHV6感染及危险因素研究.docVIP

慢性牙周炎EBV—1及HHV—6感染及危险I 素研究 【摘要】目的通过临床实践，分析慢性牙周炎EBV-1 和HHV-6感染及其危险因素。方法选取60位慢性牙周炎 患者为研究对象，将其EBV-1与HHV-6阳性率与牙周健康者 相比。然后通过病例-对照研究与logistic多因素回归分析， 找出EBV-1与HHV-6感染的影响因素。结果慢性牙周炎患 者EBV-1与HHV-6的阳性感染率明显高于牙周健康者。结论 慢性牙周炎患者的EBV-1和HHV-6感染率较高。EBV-1感染 与患者的年龄、CP以及牙周袋深度有关；而HHV-6感染与患 者的年龄与CP有关。 【关键词】慢性牙周炎；EBV-1 ； HHV-6；感染；危险 因素 牙周病是一种频发的口腔疾病，严重威胁着人的身心健 康。而慢性牙周炎作为一种常见的牙周病，不仅发病率高， 而且较难治愈，给牙周炎患者带来了健康威胁。截至目前， 我国仍未彻底解决牙周炎发病机制问题，现实中比较流行的 “细菌致病学说”并不能合理解释牙周病间断性爆发以及 部位特异性，而且临床实践效果并不理想。而在病毒研究中 发现，EBV-1与HHV-6感染是慢性牙周炎疾病的重要诱因。 因此，分析EBV-1和HHV-6感染与慢性牙周炎的关系，找出 治疗慢性牙周炎的办法，成为本研究的主要内容。 1资料与方法 1.1 一般资料本研究以2011年在本院诊治的60位 慢性牙周炎患者为研究对象。其中，男患者34例，女患者 26例，平均年龄为41岁。此外，所有调查对象在就诊前1 个月内未服用任何抗生素，且1年内也未作任何牙周炎方面 的治疗。 1.2提取样本对慢性牙周炎患者进行样本提取，分 别以牙周袋最深两牙的舌侧以及颊侧的远中、中间、近中六 个位点为样本。在采样以前，先用1%浓度的H202溶液进行 漱口；在采样过程中，用无菌纸尖轻轻插入牙齿龈沟至沟底 30秒进行取样;在取样以后，将纸尖放于灭菌EP管并在-20°C 冷冻条件下保存。 1.3 nPCR应用巢式PCR技术检测龈沟液中2种疱疹 病毒：人疱疹病毒6型（英文名为HHV-6）以及EB病毒1型 （英文名为EBV-1）。引物合成：EB病毒1型根据Parra B 所应用的设计方法进行引物设计，人疱疹病毒6型根据 SvetlanaChapenko所应用的设计方法进行引物设计。 PCR体系：总反应体系20u , 1内含2XTaq PCRMasterMix 10 u h 0. 7ul 的上下游引物、1 u 1 的 DNA 模板提取液，用水补至20 Pl。 第一轮PCR反应条件：EBV-l、HHV-6反应条件相同，94°C 预变性三分钟后，进入主循环。 第二轮PCR反应条件：取第一轮PCR反应结果为模板， 在第一轮的基础上再扩增32个循环。EB病毒1型的反应条 件为94°C预变性三分钟后，进入主循环。人疱疹病毒6型反 应条件是94°C预变性三分钟后，进入主循环。 对照设置：实验研究中将EBV-1、IIHV-6两种病毒的DNA 为模板的阳性对照，无菌去离子水为阴性对照。 1.4统计学分析为了增强数据统计效果，通常会采 用SPSS13.0统计软件进行操作。而且，最好通过x 2检验 进行率的比较。如果理论数5,那么P值计算应当采用Fisher 法。在感染危险因素方面，首先进行单因素x2检验，然后 进行多因素分析。当P0.05时，表示具备显著性差异。 2结果 调查结果显示，慢性牙周炎患者的EBV-1阳性率和HHV-6 阳性率分别为72. 1%、46.9%,明显高于牙周健康者的16.8%、 11.2%,两者的P0. 05，具有明显的差异性和统计学意义。 EBV-1与HHV-6阳性感染危险因素x 2检验结果：首先， 通过Fisher法，计算慢性胃炎、冠心病、糖尿病组的P值； 然后，在此基础上，筛选出慢性牙周炎、牙周袋深度组进入 logistic回归模型。 EBV-1与IIIIV-6多因素logistic回归模型分析结果： EBV-1感染与患者的年龄、CP以及牙周袋深度相关；而HHV-6 感染与患者的年龄与CP相关。 3讨论 本实验结果显示慢性牙周炎中EBV-1阳性感染率较高， 与牙周健康者的阳性感染率有着明显的差异，这与国外研究 出的感染率相近。本实验中HHV-6的阳性感染率是46.4%， 其与国外学者对慢性牙周炎报道相似。通过研究显示牙龈指 数与EBV感染密切相关，所以将牙龈指数例如到实验设计当 中。在实验研究的过程中，为发现其他影响因素对牙周组织 感染的影响。本实验应用病例一对照方式，并引入其他分析 方法，对慢性牙周炎与EBV-1、HHV-6感染相关性进行分析。 在以前的实验研究显示吸烟是CP的危险因素，但是在 本实验的研究结果显示吸烟与病毒感染无关。出现这种情况 的原因，可能是吸烟对细菌与病毒的感染