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——评价医疗器械清洗效果 北京创新世纪生化科技发展有限公司 ATP生物荧光检测技术 器械清洗的目的： 降低器械上微生物负荷； 去除器械上的有机物和无机物； 控制包装区的污染，达到环境标准要求； 确保灭菌达到无菌保障水平（SAV）10-6 ATP检测示意图 残留污染物 细菌细胞中含有ATP 有机污染物中含有ATP ＋ O2 萤光素酶 荧光素 反应发光 细菌 含ATP有机物残留 清洗质量是保证灭菌成功的前提 降低微生物负荷： 去除大多数微生物后，再进行消毒和灭菌，才能有效的达到消毒灭菌效果； 去除微生物滋生的条件，阻碍残留的微生物繁殖（有机物、温度 ） 减少热源的产生（革兰氏阴性杆菌灭活后，细胞壁释放的内毒素） 深度清洁监测中ATP生物荧光法更全面 消毒不合格 清洁不合格 培养法：不合格 ATP法：不合格 ↑ ↑ 培养法：合格 ATP法：不合格 ↑ 培养法：合格 ATP法：合格 清洁不合格 消毒合格、清洁合格 有效去除残留的有机物可阻断微生物滋生环境 清洗质量是保证灭菌成功的前提 去除有机物或杂质： 覆盖在器械上的有机物或无机物，灭菌剂不易穿透，有效的保护了细菌芽孢的灭活。使用中脱落在病人的体内（转移其他病人），可引起脏器粘连和伤口内感染，甚至危及病人生命。 ATP存在于细胞内 ATP（三磷酸腺苷）存在于动物细胞、细菌细胞、植物细胞中，同类活细胞内的含量基本一致； 体细胞ATP含量大约为1×10-15 mol ATP； 细菌细胞中ATP含量大约为2×10-18 mol ATP； 细胞在自然凋亡的情况下，ATP含量会有所变化； 因此可通过ATP的残留量，直接反映清洁的效果。 技术原理 沾染在物体表面、医疗器械上的血液、组织液等体液中含有大量的体细胞和细菌等污染物，这些生物污染可以通过ATP生物荧光法测出。 萤光素酶在Mg2＋、ATP、O2的参与下进行酶促反应放出光子 仪器定量测定加入ATP标准品前后的相对发光值RLU，从而获知污染物中的ATP含量，来判断医疗器械的污染程度和清洗效果。 通过使用体细胞ATP消除技术，也可对残留细菌进行检测。 ATP的可重复性实验 以细菌内ATP为指示物，取105大肠埃希菌（ATCC8099）菌悬液50μL，加入无菌离心管中进行ATP含量测定并用菌落计数法对照；上述试验重复三天，每天同一管菌液重复测十次；将每天测的次数与ATP含量之间的关系进行曲线标定。 菌落总数（CFU） 第一天 1.78×104 第二天 1.23×104 第三天 1.88×104 中国CDC消毒检测中心ATP生物荧光法与细菌计数法的相关性研究 金黄色葡萄球菌（ATCC6538）测定结果： 菌落计数 相对光单位 CFU Log (CFU) RLU Log （RLU） 2.79×108 8.45 4582901 6.66 2.78×107 7.44 2321700 6.37 2.76×106 6.44 699931 5.85 2.81×105 5.45 81096 4.91 2.75×104 4.44 8160 3.91 2.82×103 3.45 985 2.99 2.82×102 2.45 176 2.25 2.75×10 1.44 120 2.08 表中cfu和RLU值均为5次试验结果平均值。 中国消毒学杂志1001-7658（2008）03-0245-04 48小时 5秒 y = 1.3199x - 0.8317 R 2 = 0.9778 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 relative light unit (Log10) colony forming unit(Log10) 金黄色葡萄球菌菌落数对数值与RLU对数值的线性关系 中国CDC消毒检测中心ATP生物荧光法与血液残留的相关性研究 对不同稀释度血液的RLU观察： 血液稀释度 相对光单位 稀释度 Log (倍数) RLU Log （RLU） 1.0×10-2 - 2 5297756 6.72 1.0×10-3 - 3 2878083 6.46 1.0×10-4 - 4 606564 5.78 1.0×10-5 - 5 73807 4.87 5.0×10-6 - 5.3 35173 4.55 2.5×10-6 - 5.6 19484 4.29 1.0×10-6 - 6 8207 3.91 1.0×10-7 - 7 1181 3.07 1.0×10-8 - 8 287 2