5谷氨酸的提取..pptVIP

5　谷氨酸的提取 发酵液中不仅有目的产物谷氨酸，还有菌体、残糖、色素、胶体物质及其他副产物 工艺选择原则：简单、操作方便、原料价格低廉、来源丰富、产品纯度高、劳动强度小、设备简单、造价低、尽量不造成或减少对环境的污染 第二节　谷氨酸发酵液的性质 发酵液呈浅黄色浆体、表面浮有少许泡沫、发酵温度一般为34-36,pH为6.5－7.5，近中性。 成分与含量 谷氨酸含量一般为10% 无机盐、残糖、色素。氨离子0.6-0.8%,残糖1% 菌体和培养基残留物 湿菌体占8% 发酵副产物乳酸、α-酮戊二酸、琥珀酸、其他氨基酸等,各种氨基酸含量均小于1% 核苷酸类物质及其降解产物腺嘌呤（0.02%－0.05%），尿嘧啶0.01%－0.03% 提取谷氨酸的方法 等电点法 离子交换法 金属盐法 盐酸水解－等电点法 离子交换膜电渗析法 第三节　等电点法提取谷氨酸 直接常温等电点法 常温下等电点母液含谷氨酸1.5－2%，一次提取收率仅60－70%。（发醇醪中谷氨酸含量为5%左右） 水解等电点法 低温等电点法 一次冷冻等电点法提取工艺，收率达78－82%母液谷氨酸含量为1.2%左右。低温提取谷氨酸） 等电－离交法 等电点－离子交换、等电点－锌盐法总回收率可达85%。 浓缩连续等电点法 工艺特点 特点：设备简单、操作方便 分类：除菌或不除菌、浓缩或不浓缩、常温或低温下加盐酸调至谷氨酸等电点3.22，使谷氨酸呈过饱和状态析出。 一、等电点提取谷氨酸的原理 谷氨酸的两性解离与等电点 谷氨酸在等电点时，正负电荷相等，总静电荷等于0，形成偶极离子，在直流电场中即不向阳极移动，也不向阴极移动，易聚集沉淀。即在等电点时，谷氨酸的溶解度最小。 酸性AA等电点为最小两个pk值平均值，碱性AA等电点为最大的两个pK值平均值。 谷氨酸的溶解度 pH对Glu溶解度的影响 温度对Glu溶解度的影响 其他杂质的影响：有其他氨基酸会导致谷氨酸溶解度增加 杂质对Glu溶解度的影响 二、谷氨酸的结晶 在等电点操作过程中，溶液中glu逐渐转变为过饱和状态，过量的溶质便结晶析出。介稳区时产生微细的晶核；然后进行养晶，育晶，使晶粒不断增大，通过控制晶核形成与晶体增长，获得满意的结晶 1、谷氨酸的晶型及其性质 а－晶型：斜六方晶体， 特点：纯度高、颗粒大、质量重，易沉降，易与母液分离。 β－晶型：粉状或针状、鳞片状，晶粒微细，纯度低，晶体无光泽，质量轻，难沉降，结晶时常与发酵液中胶体特质粘结，形成鱼子状，悬浮在母液中或搅拌轴周围，不易沉淀分离，常称为轻质氨基酸。 影响谷氨酸晶型的主要因素 谷氨酸含量（4－8%） 室温自然冷却条件下，随溶液谷氨酸含量升高， β晶型增多，水分增加，母液难分离。 在4%以上，等电提取容易，收率高；若含量在1.5－3.5%常温下不易达过饱和状态，结晶生成速度慢，难形成晶核或晶核数量极少。（加高流分、投晶种） 影响谷氨酸晶型的主要因素 温度与降温速度（超过30℃β晶型明显增加）为避免形成β晶型，在等电点法提取谷氨酸时必须把发酵液温降到30以下再进行晶体析出。 影响谷氨酸晶型的主要因素 3.加酸速度（加酸中和到pH5左右可快些，pH5以下，起晶前后，加酸要慢，发现晶核应立即停止加酸，育晶2h，使晶核成长，缓慢加酸中和到pH3.2，搅拌育晶） 　　常用硫酸而不用盐酸中和， 　　终pH要准，常调节终点到3.0－3.2，停酸半小时，取样复测pH。 加酸速度对晶型的影响 影响谷氨酸晶型的主要因素 4. 投晶种与育晶 结晶理论表明，溶液为过饱和时，经历介稳区和不稳区两个区域。介稳区决定晶核的成长，不稳区决定晶核的形成，故投种要注意时间。 育晶：pH中和至4.5时，要仔细观察晶核生成情况，当能目视晶核时，说明晶核不少，可作为第一步pH终点值，停酸育晶，过2h后，逐步把pH调到结晶点，使晶核成长，形成结晶颗粒。 影响谷氨酸晶型的主要因素 搅拌的影响（25rpm） 搅拌有利于晶体成长，避免晶簇生成，但搅拌太快，液体翻动剧烈，会引起晶体磨损，对晶体成长不利，结晶细小 搅拌太慢，液体翻动不大，晶体易下沉，pH和温度不均匀，引起局部pH过低，形成过多微细晶核，结晶颗料大小不一，不易与菌体分离，影响收率。 影响谷氨酸晶型的主要因素 菌体 残糖 L－谷氨酰胺 杂菌和噬菌体 水解糖液质量 不同谷氨酸产生菌种对谷氨酸结晶晶型的影响 玉米浆胶体过多时对结晶的影响 某些氨基酸、多肽类物质及杂质的影响：Ｌ－天冬氨酸、Ｌ－苯丙氨酸，Ｌ－酪氨酸，Ｌ－亮氨酸及Ｌ－胱氨酸能促进а－晶型的生成。 残糖对晶型的影响 在相同条件下，影响谷氨酸晶型的关键因素是加酸速度 三、等电点工艺类型 带菌体直接常温等电点法 带菌体冷冻低温一次等电点法 除菌体常温等电点法 浓缩水解等电点法 低温浓缩等电点法 从结晶方