溶氧浓度对谷氨酸发酵关键酶的影响＋-食品与发酵工业.PDF

溶氧浓度对谷氨酸发酵关键酶的影响+ 郜 培1 陆静波1 段作营1 毛忠贵1 史仲平1’2 1(江南大学生物工程学院，无锡，214036)2(江南大学工业生物技术教育部重点实验室，无锡，214036) 摘 要 谷氨酸发酵中，不同溶氧条件对产物谷氨酸和主要副产物乳酸的生成积累影响很大。文中研究了不同 溶氧条件下和几种非正常条件下的谷氨酸发酵中主要关键酶(谷氨酸脱氢酶和乳酸脱氢酶)的变化规律，为谷氨 酸发酵的进一步优化和控制提供了基础数据。 关键词 谷氨酸脱氢酶(GDH)，乳酸脱氢酶(LDH)，溶氧水平，谷氨酸发酵 谷氨酸发酵是氮素同化的过程，氮的同化是关键 于辅酶从复合物上的解脱速率，其催化动力学反应机 步骤。实验证明，在谷氨酸生产菌中，谷氨酸脱氢酶 制为严格的顺序催化机制[6，7|。 (GDH)的活力很强，氮的同化主要是以谷氨酸脱氢 文中研究了在不同溶氧条件下进行谷氨酸发酵 酶催化的，它是谷氨酸合成中的关键酶。谷氨酸脱氢 过程中谷氨酸脱氢酶和乳酸脱氢酶的酶活变化，以确 酶以NADPH作为辅酶催化a一酮戊二酸转变成谷氨定溶氧水平对谷氨酸发酵中关键酶的影响。 酸，这个反应是可逆的【12J。 1 材料和方法 d一酮戊二酸+NH3+NADPH∞谷氨酸+ NADP 1．1 菌 种 谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenase，GDH) 是1种依赖辅酶的脱氢酶，它分为NADH依赖型(S9114，本实验室保存菌株。 EC．1141112)、NAD(P)H依赖型(EC．1141113)和 1．2培养基 NADPH依赖型(EC．1141114)，广泛存在于动物、植 25， 种子培养基组成(g／L)：C6H1206·H20 物和微生物中，在氮代谢中具有重要作用。近年来， 1．5，MgS040．6，MnS04 K2HP04 对于谷氨酸发酵过程中谷氨酸脱氢酶酶活的影响因 7．O 素已经做过一定的研究。宋香等做了CeCl。对谷氨～7．2。 酸棒杆菌S9114生长和谷氨酸脱氢酶的影响的研 06·H20140， 发酵培养基组成(g／L)：C6H12 究b1；张克旭等做了不同温度、pH对谷氨酸脱氢酶K2HP041．0，MgS040．6，MnS04 的影响的研究L4o；zhuang等做了镧系金属离子对谷 氨酸脱氢酶活性的影响机理的研究bJ。 7．0～7．2。 灭菌加入)。pH 乳酸脱氢酶(Lactate dehydmgeanase，LDH)广泛 1．3发酵和培养条件 存在于动物组织和各种微生物细胞内，它催化糖酵解 种子培养条件：从活化斜面接2环于种子培养基 的最后一步反应，即丙酮酸向乳酸的转化。无论是在 中，在32℃、200r／min条件下培养8～10h，镜检细 高等动物还是低等动物中，LDH均是借助辅酶烟酰