细胞工程课件 (2).pptVIP

植物组织培养的发展简史 ① 探索阶段（19世纪初－30年代中） 德国植物生理学家HaHerlandt首次进行了植物细胞培养实验 ② 奠基阶段（30－50年代） 1934年，White培养番茄离体根尖成功 1939年，Gautheret连续培养胡萝卜根形成层首次成功 White:烟草种间杂种的瘤组织进行组培 Nobecourt：胡萝卜进行组培 以上三人是植物组织培养的奠基人 ③ 迅速发展阶段（60年代后） 原生质体，花药，快繁技术迅速发展 植物组织培养的发展简史 1958年Steward和Reinert用胡萝卜根的愈伤组织诱导成了体细胞胚，并进而获得了完整植株。 科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。 植物组织培养 外植体： 从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官　　 （条件一：离体） 外植体： 1）外植体灭菌消毒（根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等） 2）用消毒过的器械将外植体置于培养皿上 3）切取所需的外植体 4）将外植体接种于培养容器的培养基上 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！ 外植体经过一段时间在培养基上生长后，会形成愈伤组织 切取 接种 植物组织培养 定义：含有一定营养成分，供组织培养植物生长的基质 矿质元素：大量元素及微量元素 有机营养成分 ① 含N物质：包括维生素和某些有机添加物 ② 碳源：蔗糖 ③ 琼脂：起支持作用 ④ 植物激素：生长素、细胞分裂素等 愈伤组织的形成 愈伤组织： 在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞（细胞排列疏松、无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞）。 愈伤组织的形成 接种 植物组织培养（试管苗的形成） 培养室 移栽 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 去细胞壁 纤维素酶 果胶酶 物理方法 化学方法： 离心 振动 电刺激 聚乙二醇 细胞分裂 植物组织培养 植物细胞融合 酶解法 人工诱导方法 3、过程 4、成果和尚未解决的问题： 成 果：克服不同生物远缘杂交的障碍， 出现自然界没有的新品种。 未解决问题：尚未让杂种植物按照人们的需要 表现出亲代的优良性状 杂种细胞AA A A 杂种细胞BB B B A B 杂种细胞AB 白菜 甘蓝 白菜－甘蓝 *  专题2 细胞工程 1996年7月5日,世界上第一只体细胞克隆动物----克隆羊多利诞生于英国, 标志着一种新的生物技术---动物体细胞克隆技术面世, 也揭开细胞工程更深层次发展的序幕! 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 什么叫细胞工程？包括哪两大领域？ 细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础 细胞的全能性 分类 主要技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 胚胎移植 核移植 植物细胞工程技术 动物细胞工程技术 2.1.1 植物细胞工程的基本技术 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 通常采用的技术手段 细胞的全能性 1、定义: 2、原理: 3、差异: 4、大小： 5、潜在全能性的原因: 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 ⑴受精卵的全能性最高 ⑵受精卵分化后的细胞中，体细胞的全 能性比生殖细胞的低。 基因的选择性表达 受精卵＞生殖细胞＞体细胞 植物细胞＞动物细胞 思考讨论：为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的，合成的蛋白质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。 Schwann在1839 年明确的指出：“如果具有与有机体内一样的条件时，每个细胞应该可以独立生活和发展”。