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实时定量PCR法预测禾谷丝核菌Rhizoctonia.PDF

微生物学通报 Sep. 20, 2014, 41(9): 1917−1923 Microbiology China © 2014 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130869 生物实验室 实时定量PCR 法预测禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis 基因组大小 1,2 2 2 2 2 2* 1* 张春燕 李伟 孙海燕 邓渊钰 张爱香 陈怀谷 王志伟 (1. 210095) (2. 210014) 摘 要【目的】准确测定基因组大小是进行禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis 全基因组序列测定 和拼接的基础,本研究旨在利用实时定量 PCR 方法预测禾谷丝核菌的基因组大小。【方法】首 先克隆了禾谷丝核菌R0301 菌株翻译延伸因子A 基因(tef A)的部分序列,Southern 杂交明确该 基因在该病菌基因组中为单拷贝。以已测序立枯丝核菌(Rhizoctonia solani) AG1-IA 融合群菌株 GD118 为对照,采用实时定量PCR 的方法进行了禾谷丝核菌基因组大小的预测。【结果】实时 定量PCR 的方法可以比较准确的测定立枯丝核菌基因组的大小,研究首次预测了禾谷丝核菌的 基因组大小位于32.2–36.6 Mb 之间。【结论】实时定量PCR 法是一种快速和简便的预测丝核菌 基因组大小的方法。 关键词禾谷丝核菌,基因组大小,翻译延伸因子A ,单拷贝,实时定量PCR Genome size estimation of Rhizoctonia cerealis with quantitative real-time PCR ZHANG Chun-Yan1,2 LI Wei2 SUN Hai-Yan2 DENG Yuan-Yu2 ZHANG Ai-Xiang2 CHEN Huai-Gu2* WANG Zhi-Wei 1* (1. College of Life Sciences, Nanjing Agricultural University, Nanjing, Jiangsu 210095, China) (2. Institute of Plant Protection, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing, Jiangsu 210014, China) Abstract: [Objective] Understanding the genome size of Rhizoctonia cerealis is the basis for the genome sequencing and assembly. In this study, we estimated the genome size of R . cerealis via the quantitative real-time PCR method. [Methods] The partial translation elongation factor A gene (tef A) of R . cerealis strain

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