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吸收光谱法:基于被测物质的分子(或原子) 对光 具有选择吸收的特性而建立的分析方法。;
物质为何对光有选择性的吸收?
光强度的减弱如何与物质的浓度联系起来?ΔI =f(c)
怎样测量光的减弱(ΔI ) ?
如何获得单色光?;1 电磁波谱
2 物质对光的吸收
3 溶液的吸光定律
4 郎伯-比尔定律适用范围;1 电磁波谱;;2 物质对光的吸收——物质的颜色与光的关系;吸收光颜色;光的波粒二象性;物质对光选择吸收的实质:物质原子或分子的核外电子能级不同,只能吸收能量与其能级差相匹配的波长的光。 ;吸收光谱 Absorption Spectrum;紫外-可见光区产生吸收的分子结构中必须有共轭π键或杂原子(生色团和助色团);300;吸收光谱法定性分析与定量分析的基础;4 溶液的吸光定律;Lambert – Beer 光吸收定律:当一束平行单色光通过均匀的样品时,其吸光度与吸光组分的浓度、吸收池的厚度乘积成正比.;吸光度(Absorbance)与透光率的关系;吸光系数ε;双硫腙法测定Pb2+,浓度为0.080mg/50ml 的Pb2+溶液,用2cm的比色皿于520nm处测得吸光度=0.28。求摩尔吸收系数。;吸光度的加合性;*;朗伯比尔定律的局限性
定律本身的局限性:
只适于稀溶液0.01mol/L
高浓度时组分间有相互作用:分子间距减小、相邻粒子的电荷分布变化等引起ε的变化
化学偏离:被分析物质与溶剂发生缔合、离解、溶剂化反应,产生不同的吸收光谱
仪器偏离:单色光不纯引起
;朗伯-比尔定律的适用条件;溶液浓度的测定;吸光度的测量;参比溶液的选择;8. 2 比色法和分光光度法;比色法和分光光度法特点
灵敏度高:测定下限可达10-3~10-6 mol·L-1, 10-4%~10-5%
准确度能够满足微量组分的测定要求:相对误差2~5%
操作简便快速
应用广泛;1)目视比色法;2) 光电比色法;;单波长单光束分光光度计:一束单色光轮流通过参比和试样溶液,由于电源波动引起的误差较大——简易型分光光度计;单波长双光束分光光度计;双波长分光光度计;分光光度计组件;氙灯;单色器:将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 ;光栅:在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。
利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。;样品池:用于盛放分析试样(对液体试液)
要求:能透过有关辐射线,为减少光的损失,吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。
紫外光区:石英吸收池
可见光区:石英或玻璃吸收池
测定注意事项:
参照池和吸收池应是一对经校正好的匹配吸收池。因为吸收池材料的本身吸光特征以及吸收池的光程长度的精度等对分析结果都有影响。
使用前后都应将吸收池洗净,不能用手接触窗口(光面)
已匹配好的吸收池不能用炉子或火焰干燥;光电倍增管(Photomultiplier Tube, PMT);不同光区的吸光光度法仪器主要差异比较;
1、波长校正:利用光源中的稳定线光谱或有稳定亮线的外部光源,把光束导入光路进行校正。如氘灯的486.02和656.10nm谱线进行校正。 或者测定已知光谱样品的光谱,与标准光谱对照进行校正,如谱钕滤光片。一些紫外-可见光分光光度计具有自动校正程序。
2、吸光度校正:一般常用碱性重铬酸钾标准溶液进行吸光度校正,测定的数值与标准吸光度表比较。
3、比色皿校正:
;①比色皿有方向性:有些比色皿上印有方向标志,使用时必须注意。校正无方向标志的比色皿时,要先确定方向并作好标志,以减少测定误差。
②同一组比色皿相互间的差异应小于测定误差。测???同一溶液时,同组比色皿之间吸光度相差应小于0.005
③校正比色皿的光吸收误差时,应将纯净的蒸馏水注入皿中,以其中吸收最小的比色皿的吸光度为零,测定其它比色皿的吸光度。测定比色液时,应将其吸光度减去比色皿的吸光度(平均值)
④校正比色皿光程长度误差时,可将吸光度约为0.4的溶液注入皿中,测定其吸光度,以具有准确光程长度的比色皿的吸光度与之比较,以标准比色皿的吸光度为基准,分别求出其与各待校正比色皿的吸光度测定值的比值。测定比色液时,可将所测得的吸光度乘以各该比值;4 722型可见光分光光度计;721或752可见光分光光度计的使用;波长选择旋钮;46;47
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