李艳博免疫的干预作用.pdf

第27 卷 第2 期 辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Vol.27, No.2 2009 年4 月 J. Radiat. Res. Radiat. Process. April 2009 多次 LDR 对 12 周糖尿病大鼠脾细胞凋亡及 免疫的干预作用 1 2 1 1 1 1 1 1 李艳博 郭彩霞 王志成 李鹏武 郭 伟 赵红光 刘 扬 龚守良 1 （吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室 长春 130021 ） 2 （吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室 长春 130021 ） 摘要 观察了多次低剂量辐射（Low dose radiation ，LDR ）对12 周糖尿病（Diabetes mellitus ，DM ）大鼠脾细 胞凋亡、免疫因子和淋巴细胞亚群的影响。将实验动物分为对照组、单纯DM 组和DM+LDR 组，照射剂量分 别为25 、50 和75 mGy ，共照射15 次。照射结束后8 周末采用流式细胞术（Flow cytometry ，FCM ）检测脾 + + 细胞中CD4 、CD8 T 细胞和TCR αβ 百分数的变化，酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbert assay ， ELISA ）检测血清和脾细胞培养上清IL-2 含量的变化，以FCM 和TdT 介导的dUTP 缺口末端标记技术（Terminal deoxynucleotidyl Transferase dUTP Nick End Labeling，TUNEL ）检测细胞凋亡。与对照组相比，DM 和DM+LDR 各组体重均下降，DM 组尤为明显；DM+LDR 组大鼠的血糖水平有升高，但低于DM 组；DM+ LDR 各组TCR αβ和CD4+ T 细胞百分数、血清和脾细胞培养上清IL-2 含量和脾细胞凋亡均升高。但与DM 组相比，DM+LDR + + + + 各组TCR α β、CD4 和CD8 T 细胞百分数及脾细胞凋亡均降低，而IL-2 含量和CD4 /CD8 T 细胞比值均升 高。研究表明，多次低剂量照射能够适当调节以减弱DM 所造成的大鼠体重减轻和血糖升高现象，纠正淋巴 细胞亚群和免疫因子失衡，降低DM 所致脾细胞凋亡，从而达到保护机体的作用。 关键词 低剂量辐射，糖尿病，淋巴细胞，脾脏，细胞凋亡，IL-2 中图分类号 R587.1 ，R852.7 ，R815 ，R730.55 Ⅰ型糖尿病是儿童和青少年最为常见的内分泌 美国），Annexin V-FITC 凋亡检测试剂盒（Bender 疾病，近年来全球患病率迅速增加，每年以3 %增 Med Systems ，Austria ），TUNEL 试剂盒（Chemicon， 长，预计2010 年发病率较1980 年增加40 % 。多种 美国），CD4、CD8 和TCR αβ抗体（Santa Cruz， 免疫机制参与糖尿病的发病。因此，应用免疫手段 美国），ELISA 试剂盒（R and D ，美）。 防治糖尿病已成为研究的热点[1] 。体内外研究表明， 1.2 实验动物和分组 低剂量辐射（Low dose radiation ，LDR ）可改变免 疫器官微环境及信息传递过程，使免疫功能增强， 雄性Wistar 大鼠180～220 g （购于吉林大学实 细胞成熟和分化加速，凋亡降低[2] 。鉴于有关多次 验动物中心），随机分为对照组（10 只）、糖尿病组 LDR