大鼠在体小肠吸收实验报告.docxVIP

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大鼠在体小肠吸收实验报告 专业:________________姓名:________________ 实验报告 学号:________________日期:________________地点:________________ 课程名称:_______________________________指导老师:________________成绩:__________________实验名称:_______________________________实验类型:________________同组学生姓名:__________一、实验目的和要求二、实验内容和原理三、主要仪器设备四、操作方法和实验步骤五、实验数据记录和处理六、实验结果与分析七、讨论、心得 一、实验目的 1、掌握大鼠在体肠管泵循环法研究吸收的试验方法。 2、掌握药物肠管吸收的机理和计算吸收速度常数和吸收半衰期t1/2的方法。 二、实验原理 1、研究药物消化管吸收试验方法:体外试验法、在体试验法和体内试验法。 2、消化管吸收药物主要方式是被动扩散。这种形式的吸收不消耗能量,其透过速度与膜两侧的浓度差成正比,可用下式表示: -dQ/dt=DKS(C-Cb)/h dQ/dt:分子型药物的透过速度D:药物在膜内的扩散系数 k:药物在膜/水溶液中的分散系数C:消化管内药物浓度Cb:血液中的药物浓度h:膜的厚度 式说明药物透过速度属于表观一级速度过程:以消化液中药物量的变化率dx/dt表示透过速度,则: -dX/dt=KaXlnX=lnX0-Kat lnX对取样时间t作图,可得一直线,从直线的斜率可求得吸收速度常数ka,其吸收半衰期t1/2为: t1/2=/Ka 小肠在吸收过程中,不仅吸收药物,也吸收水分,导致供试液体积减少,故不能用直接测定药物浓度的方法计算剩余的药量。酚红不被小肠吸收,因此向供试液中加入定量的酚红,在一定间隔时间测定酚红的浓度,就可以计算出不同时间供试液的体积,再根据测定的药物浓度,就可以得出不同时间小肠中剩余的药量或被吸收的药量。 三、实验仪器及试剂 仪器:蠕动泵 试剂:供试液、酚红液、20%乌拉坦、生理盐水、%NaNO2溶液、1mol/L盐酸、/LNaOH、%氨基磺酸铵(NH2SO3NH4)溶液、% 萘乙二胺溶液 四、实验步骤 1、循环试验的操作 恒温水浴调节:将水浴温度调节为37±℃。 供试液的准备:量取75-80ml供试液加入循环装置的烧瓶中,置恒温水浴中预热至37±℃。生理盐水的准备:取生理盐水适量,预热至37℃备用。蠕动泵流速的调节:调节流速为5(来自:写论文网:大鼠在体小肠吸收实验报告)ml/min和/min。 大鼠麻醉:取大鼠一只称重,按/kg体重腹腔注射乌拉坦麻醉,并固定于固定台上。 小肠两端插管;沿大鼠腹部中线打开腹腔,在12指肠上部和回肠下部各切一小口,插入直径为的玻璃管,并用线扎紧。 肠管洗涤:用注射器将37℃的生理盐水缓缓注入肠管,洗去肠管内容物至净。 作成回路:将肠管两端的玻璃管按图所示与胶管连接,作成回路,开动蠕动泵,其流速为5ml/min。取样:以5ml/min流速循环10min后,将流速调节为/min时,立即自供试液烧瓶中取样两份,分别作为SD和酚红零时间样品,另向烧瓶中补加酚红液2ml,其后每隔15min亦按同法取样及补加酚红液,共取样9次,停止循环。 2、SD的测定 取样品1ml置10ml带塞试管中?加入1mol/LHCl5ml,摇匀,?加%NaNO21ml,摇匀,放置3min?加%NH2SO3NH41ml,摇匀,放置3min?再加%萘乙二胺2ml,摇匀,放置20min。在550nm的波长处测定吸收度。 比色空白液:取酚红液1ml代替样品,其余操作与样品处理一致。 3、酚红的测定 取样品置10ml带塞试管中,加/LNaOH5ml,摇匀,在555nm的波长处测定吸收度。比色空白液:/LNaOH 五、实验数据记录和处理 1、标曲回归方程: SD:y=(R2=)酚红:y=+(R2=) 2、SD和酚红样品浓度计算 计算结果如下表: 表1大鼠在体小肠吸收量的计算 SD取样时 间abs浓度ug/ml循环前20 0  酚红 abs浓度ug/ml 20 供试液体积 ml75  剩余药量X1500   lnX   1  2 lnX~t作图,得一条直线,作图如下: 图1大鼠在体小肠吸收后剩余药量对时间的曲线 求得Ka=,t1/2=h 3、每小时吸收率计算 每小时吸收率=/零时间剩余药量*100%=% 六、实验结果及分析 实验结果详见实验数据记录 七、讨论心得 思考题: 1、在体吸收实验法的特点是什么? 在体试验法不切断血管和神经,药物透过上皮细胞后即被血液运走,能避免胃内容物排出及消化管固有运动等的生理影响,对溶解药物是一种较好的研究吸

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