GB-541314-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B12 的测定.pdfVIP

中华人民共和国国家标准 GB 5413.14—2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素 B12 的测定 National food safety standard Determination of vitamin B12 in foods for infants and young children, milk and milk products 2010-03-26 发布 2010-06-01 实施 中华人民共和国卫生部 发布 GB 5413.14—2010 前 言 本标准代替GB/T 5413.14-1997 《婴幼儿食品和乳粉维生素B12的测定》。 本标准与GB/T 5413.14-1997相比，主要变化如下： ——标准名称改为《婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定》。 本标准附录A为规范性附录。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ——GB 5413-1985 、GB/T 5413.14-1997 。 I GB 5413.14—2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素 B12 的测定 1 范围 本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素 B12 的测定方法。 本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素 B12 的测定。 2 规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本 适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 3 原理 利用莱士曼氏乳酸杆菌（Lactobacillus leichmannii ）对维生素B12 的特异性和灵敏性，定量测定出 试样中维生素 B12 的含量。在测定用培养基中供给除维生素B12 以外的所有营养成分，这样微生物生长 产生的透光率就会同标准曲线工作液及未知待测溶液中维生素 B12 的含量相对应。以不同浓度标准溶液 的透光率相对于各浓度水平标准物质的浓度绘制标准曲线，根据标准曲线即可计算出试样中维生素B12 的含量。 4 试剂和材料 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的二级水。 4.1 菌株：莱士曼氏乳酸杆菌（Lactobacillus leichmannii ）ATCC 7830 。 4.2 维生素 B12 （Vitamin B12 或 Cyanocobalamin ）标准品：分子式 C63H88CoN14O14P ，纯度≥99% 。 4.3 培养基 4.3.1 乳酸杆菌琼脂培养基：见附录 A 。 4.3.2 乳酸杆菌肉汤培养基：见附录 A 。 4.3.3 维生素 B12 测定用培养基：见附录 A 。 注：一些商品化合成培养基效果良好，商品化合成培养基按标签说明进行配制。 4.4 9 g/L 氯化钠溶液（生理盐水） 称取 9.0 g 氯化钠溶解于 1000 mL 水中，分装于具塞试管，每管 10 mL。121 ℃灭菌 15 min。 4.5 乙醇溶液：体积分数为25 % 。 4.6 无水磷酸氢二钠（Na HPO ）。 2 4 4.7