抗新城疫病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的研制及特性研究-预防兽医学专业毕业论文.docxVIP

扬卅I大学硕士学位论文 扬卅I大学硕士学位论文 2 抗新城疫病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的研制 及特性研究 研究生：薛敏 导师：秦爱建教授 摘要 新城疫(Newcastle disease，ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)引起 的一种极易传染的烈性传染病，自1926年发现并分离到病毒，新城疫至今还在世界范围内 发生、流行，对养禽业造成严重危害。新城疫病毒核衣壳蛋白是组成核衣壳最主要的结构 蛋白，也可能是刺激机体产生细胞免疫反应的成分。NP蛋白的主要功能是与P(磷蛋白)和 L(大蛋白)结合包裹基因组RNA形成一个螺旋的核糖核蛋(a(mqP)复合体，在基因组RNA 转录和复制的过程中起着非常重要的作用。本研究以NDV F48E8株为研究对象，以Genbank 公布的NDV SRZ03株基因序列(登陆号：EUl67540)为模板，设计一对引物，用RT．PCR 方法对NP基因进行了克隆，经序列测定和分析正确后，进行了原核表达，制备了针对NP 蛋白的单克隆抗体，为新城疫病毒的深入研究及临床检验提供了新材料。 一、新城疫病毒NP基因的克隆及序列分析 利用德国AXYGEN公司的总RNA小量提取试剂盒提取NDV F48E8株的RNA，根据 Genbank公布的NDV SRZ03株基因序列(登陆号：EUl67540)， 设计一对特异性引物，用 RT．PC