抗纤Ⅰ号方剂和硒抗实验性大鼠肝纤维化的配伍机理、免疫调节及其分子机制的研究-中西医结合基础专业毕业论文.docx

中文摘要抗纤I号方剂和硒抗实验性大鼠肝纤维化的配伍 中文摘要 抗纤I号方剂和硒抗实验性大鼠肝纤维化的配伍 机理、免疫调节及其分子机制的研究 摘 要 肝纤维化(hepatic fibrosis)是一切慢性肝病的共同病理学基础，是形成 肝硬化的必经病理阶段。肝硬化是我国乃至世界疾病谱中的常见病、多发 病，严重危害着人类的健康。研究发现肝纤维化有逆转的可能，若在肝纤 维化时期积极治疗，其预后将大大改观。然而到目前为止，国内外尚无理 想的抗肝纤维化的药物。中药治疗肝纤维化有着悠久的历史，在治疗肝脏 疾病方面具有独到的优势。正交设计是一种高效、快速、经济的多因素试 验设计方法。研究发现中药具有良好的免疫调节作用，硒与机体免疫功能 密切相关。为此，本研究拟采用正交设计分析中药复方抗纤I号方剂的配 伍机理，探讨抗纤I号方剂和硒对实验性肝纤维化大鼠免疫功能的调节作 用。 肝纤维化的形成与发展是极其复杂的过程，对其分子机制的研究成为 当今国际研究的热点。研究表明多种细胞因子参与肝纤维化的发生。其中， 转化生长因子B l(TGF．13 1)是目前所知的最强大的促胶原生成因子，在 肝纤维化的起始和持续发展中起关键作用，因而成为肝纤维化治疗的重要 目标。细胞核因子K B(NF．K B)是细胞中一个重要的转录因子。研究认 为NF—K B具有广泛的生物活性，参与调节免疫反应及炎症过程，促进炎 性基因及TGF．13 l基因的转录。目前中药复方通过下调TGF—p I表达，降 低NF—K B与DNA结合活性治疗肝纤维化已有报道，但均较为零散。本 研究有机结合整体和离体实验，从基因和蛋白水平探讨抗纤I号方剂治疗 肝纤维化的效果及其作用的分子机制，为I晦床治疗提供理论依据。 第一部分 抗纤I号方剂的配伍机理及优化复方和硒 抗大鼠肝纤维化的实验研究 目的：探讨抗纤I号方剂的配伍机制，比较优化复方和硒抗实验性 大鼠肝纤维化的作用。 中文摘要方法：以SD大鼠皮下注射CCl。、胆固醇饲料等复合因素制造大鼠肝 中文摘要 方法：以SD大鼠皮下注射CCl。、胆固醇饲料等复合因素制造大鼠肝 纤维化模型，重复正交设计，6因素(7昧中药)，2水平(用与不用)， 按L16(215)iE交表组成15个处方，将肝纤维化的大鼠随机分组，用不同处 方的中药灌胃6周，检测大鼠血清ALT、ALB、Hyp、HA的含量，筛选 出有显著作用的中药。根据中医治疗肝纤维化的治则，将筛选出的中药组 成抗纤II号和抗纤III号(优化复方)。SD大鼠随机分为空白对照组、肝纤 维化模型组、模型恢复组、秋水仙碱组、抗纤I号组、抗纤I号加硒组、 抗纤II号组、抗纤II号加硒组、抗纤III号组和抗纤III号加硒组，大鼠肝纤 维化模型成功后用相应药物灌胃6周，检测各组大鼠肝组织Hyp含量、 血清酶(ALT、AST、ALB和GLO)含量、血清肝纤维化指标(HA、LN、 PCIII和ⅣC)含量、肝脏病理改变，比较优化复方及各方剂加硒的治疗作 用。 结果；正交试验方差分析显示：丹参(A)用与不用，对降低越』含量 和提高ALB含量有显著性差异(p0．05)；郁金(C)主要提高ALB含量， 降低HA含量(pO．05)；三棱、莪术(D)重在降低HA含量(庐0．05)；鳖 甲(E)的功效主要在于降低肝组织的Hyp含量(p0．05)。优化复方和硒抗 大鼠肝纤维化的检测结果显示：与空白对照组相比，其余各组大鼠血清 Hyp、ALT、AST均不同程度升高。各优化复方和硒治疗组的ALT明显低 于秋水仙碱组。抗纤I号和抗纤I号加硒组的Hyp、AST明显低于秋水 仙碱组(101．1±38．4，96．8±40．7 VS 152．8±39．8；150．8±34．0，154．6± 27-3 VS 215．8±24．6，pO．05)。抗纤II号和抗纤III号Au’明显高于抗纤I 号组(81．9±14．8，77．2±11．6 VS 65．8±11．5，p0．05)。与空白对照组相 比，其余各组大鼠血清HA、LN和PCIII均显著升高。各优化复方和硒治 疗组HA、LN均显著低于秋水仙碱组。抗纤II号和抗纤III号HA明显高 于抗纤I号组(341±84，347±41 VS 228±63，p0．05)。各组大鼠肝脏 病理检查结果：模型恢复组大鼠肝纤维化分级多处于III级和Ⅳ级，秋水仙 碱组多数处于II级和III级。各优化复方和硒治疗组大多处于I级和II级。 各优化复方和加硒治疗组与秋水仙碱组相比均有显著性差异俨O．05)。各 方剂与加硒组相比，均未显示出显著性差异。 结论：丹参既可显著提高实验性肝纤维化大鼠血清ALB，又可降低 血清AST含量；郁金主要提高血清ALB含量、降低血清HA含量；三棱、 主查塑墨莪术重在降低血清HA含量；鳖甲的功效主要在于降低肝组