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第39 卷 第 5 期 渔 业 科 学 进 展 Vol.39, No.5 2 0 1 8 年 1 0 月 PROGRESS IN FISHERY SCIENCES Oct., 2018 DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20170427001 / 陈晓彤, 黄立萍, 孙谧, 郝建华. 响应面分析法优化-环糊精的酶转化工艺. 渔业科学进展, 2018, 39(5): 143–151 Chen XT, Huang LP, Sun M, Hao JH. Optimization of conversion process of α-cyclodextrin with enzyme using response surface methodology. Progress in Fishery Sciences, 2018, 39(5): 143–151 响应面分析法优化α-环糊精的酶转化工艺* 1,2 1,2 1 1① 陈晓彤 黄立萍 孙 谧 郝建华 (1. 农业农村部极地渔业开发重点实验室 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071 ；2. 上海海洋大学食品学院 上海 201306) 摘要 为获得较高的α-环糊精转化产率，采用单因素实验和响应面实验方法，筛选底物种类、底 物浓度、加酶量、酶作用时间、作用温度和pH 等多个单因素，对海洋芽孢杆菌Y112 产的α-环糊 精葡萄糖基转移酶产α-环糊精的条件进行了优化。然后利用Plackett-Burman 实验筛选得到影响α- 环糊精转化率的3 个主要因素：底物浓度、温度和pH 值。最终采用响应面分析法得到的最佳转化 条件为马铃薯淀粉浓度为5% ，加酶量200 U/g(淀粉) ，pH 值为8.4 ，温度30℃，200 r/min 反应6 h ， α-环糊精转化率均值为28.67% ，比优化前的产率提高了2.48 倍。 关键词 α-环糊精葡萄糖基转移酶；响应面分析法；α-环糊精；转化工艺 中图分类号 S932 文献标识码 A 文章编号 2095-9869(2018)05-0143-09 环糊精(CD)是由环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase) 84.6% ，比单独使用α-CGTase 的转化率提高了31.2% 。 作用于直链淀粉而产生的环状低聚糖(Valle et al, 目前，环糊精的应用依然受到环糊精产量的制约，继 2004) ，常见的有 α- 、β-和 γ-环糊精。环糊精可以包 续研究提高环糊精产率的方法具有重要意义。 埋形状各异和适当大小的疏水性客体分子，进而改变 本研究对前期筛选到的来自黄海海域的海洋芽 它们的理化性质(Biwer et al, 2002)。环糊精的化学性 孢杆菌 Y112 的α-CGTase 生产 α-环糊精的条件进行 质均较稳定，α-环糊精在体内的代谢作用最慢且无毒 优化，旨在提高α-环糊精的产量，以便应用于食品药 (Arima et al, 2011)。环糊精在医药(朱征等, 2016) ，化 品等领域。 妆品(李姝静等, 2016)、环保领域(张洪伟, 2014)等有 良好的应用前景，而且作为一种新型的膳食纤维逐渐 1 材料与方法 走入人们的视野(Artiss et al, 2006) 。 1.1 酶的来源 大多数CGTase 生成的是多种环糊精的混合体。 Bharat 等(2001)利用来自肺炎克雷伯菌AS-22 分泌的