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- 2019-05-05 发布于湖北
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钠钙交换体基因稳定转染跟药物筛选细胞模型的建立文档
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钠钙交换体基因稳定转染及药物筛选细胞模型的建立
龙雁,袁辉,王晓良*
中国医学科学院北京协和医学院 药物研究所 先农坛街1号,北京,100050
摘要:目的 构建三种不同亚型的CHO-NCX稳定转染细胞株,以便筛选可能的钠钙交换体(NCX)调节剂。 方法 采用脂质体法将NCX目的基因稳定导入CHO细胞中,检测稳定转染细胞株中NCX的蛋白表达和电流大小,并观察温度和NCX抑制剂KB-R7943对电流的影响。 结果 Western blot结果显示与CHO-pcDNA3.1空白细胞相比,CHO-NCX稳定转染细胞株中NCX蛋白的表达量显著升高;电生理结果提示CHO-NCX稳定转染细胞株中NCX电流远大于CHO-pcDNA3.1空白细胞;温度从22℃升高到35℃时,NCX电流显著增大;NCX抑制剂KB-R7943对INCX具有显著抑制作用。 结论 本试验成功的建立了特异性表达
关键词:NCX1.1;NCX1.4;NCX1.5;NCX抑制剂 KB-R7943;膜片钳
Establishment and Evalution of Cell Model Targeted at Sodium-Calcium Exchanger
Long Yan, Yuan Hui, Wang Xiaoliang (In
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