实验巨噬细胞酸性磷酸酶显示.pptVIP

实验八、巨噬细胞酸性磷酸酶显示 组织化学（histochemistry）和细胞化学（cytochemistry） 是在组织切片上或被检材料上，加一定试剂，使它与组织或细胞中待检物质发生化学反应成为有色沉淀物，以用光镜观察，若为重金属沉淀，可以用电镜观察，称电镜组织化学（electron microscope histochemistry)。这种方法可用于检测细胞内的酶类、糖类、脂类、核酸与某些金属元素等。如进一步应用显微分光光度计等测定标本中沉淀物的强度，则能较精确地进行定量研究。 1. 糖类显示法 最常用的显示方法是过碘酸-雪夫反应（periodic acid Schiff，PAS反应)。 基本原理是：糖被强氧化剂过碘酸（HIO4)氧化后，形成2-醛基；后者与Schiff试剂中的无色品红亚硫酸复合物结合，形成紫红色反应产物,PAS反应阳性部位即表示多糖的存在。 2. 酶类显示  酶的显示法是通过显示酶的活性来表明酶的存在，而不是酶的本身。 将具有酶活性的组织放人含有一定底物的溶液中孵育，底物经酶的作用形成初级反应产物，它再与某种捕捉剂相反应，形成显微镜下可视性沉淀，即最终反应产物。 3．脂类显示  脂类物质包括脂肪与类脂。 标本可用甲醛固定、冷冻切片、用油红、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅵ、苏丹黑B、尼罗蓝等脂溶性染料染色；亦可用锇酸固定兼染色，脂类呈黑色。  4．核酸显示法 显