通微HPLC-ELSD分离检测4种典型胆汁酸.pdfVIP

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2019-07-04 发布于台湾
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通微HPLC-ELSD分离检测4种典型胆汁酸.pdf

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通微 HPLC-ELSD 分离检测 4 种典型胆汁酸 1. 背景介绍胆汁酸在肝脏中由胆固醇合成，是机体类固醇物质的主要清除途径。胆汁酸除促进肠道对脂肪的消化吸收外，还具有多种重要的能量代谢调节作用，例如调节机体脂类和糖类代谢。目前胆汁酸分析方法主要是分析血样及排泄物中的胆汁酸水平。但鉴于胆汁酸的紫外吸收较弱，为末端吸收（205nm ），采用传统 HPLC-UV 法检测的灵敏度与准确度均不理想。目前，胆汁酸类成分的测定手段多为 HPLC-ELSD 法和 LC-MS ，其中 HPLC-ELSD 法具有较低的成本以及较易维护的特点而更利于方法的推广使用。所以，本实验采用HPLC-ELSD 法进行了4 种典型胆汁酸的有效分离检测。 2.测试条件仪器： EasySep ®-1020 液相色谱系统，配备ELSD 检测器 n c Halo 5 C18 (250 ×4.6mm, 5μm) 色谱柱： . 货号：95814-902 ； m o 3.测试结果 c 1）色谱图 h. c e t 100 o r 80 c i 酸胆酸氧酸胆 60 m 去 ) i 胆氧 V 去 m 猪 ( n 号 40 酸信u 胆石 20 0 0 5 10 15 20 25 时间(min) 图1 HPLC-ELSD 检测4 种胆汁酸色谱图 4.结论采用高效液相色谱蒸发光散射检测器测定 4 种典型胆汁酸，可以有效避免胆汁酸紫外末端吸收弱的缺陷，大大提高了检测结果的准确性。方法简便、准确、灵敏度高、重现性好，可以满足日常分析需求。 5.配置列表 EasySep®-1020 高效液相色谱仪（配二元高压梯度泵、UNIEX-7700 ELSD 检测仪器、AS2000 自动进样器、柱温箱）器 Unimicro ChromStation