黄海胶州湾海区腹泻性贝毒素的特征和时间变化规律研究-动物遗传育种与繁殖专业毕业论文.docxVIP

上海海洋大学硕士学位论文黄海胶州湾海区腹泻性贝毒素的特征和时间变化规律研究 上海海洋大学硕士学位论文 黄海胶州湾海区腹泻性贝毒素的特征和时间变化规律研究 The Profiles and Seasonal Variation of Diarrhetic Shellfish Poison in the Jiaozhou Bay Yellow Sea(China) ● 学位论文完成时间： 指导教师签字： 答辩委员会成员签字： ● ● 上海海洋人学硕十学位论文黄海胶州湾海区腹泻性贝毒素的特征和时间变化规律研究 上海海洋人学硕十学位论文 黄海胶州湾海区腹泻性贝毒素的特征和时间变化规律研究 摘要 腹泻性贝毒素(Diarrhetic shellfish poisoning，DSP)是较为常见的一类藻毒素，通 ● 常由甲藻产生。其组分包括大罔软海绵酸(Okadaic acid，OA)、鳍藻毒素 (Dinophysistoxins，DTXs)、蛤毒素(Penctenotoxins，PTXs)和虾夷扇贝毒素 (Yessotoxins，YTXs)等。其中OA和DTXs可导致人们发生严重的胃肠功能紊乱， 出现腹泻、呕吐和腹痛等中毒症状。尽管OA和DTXs并无显著的急性毒性效应， 且迄今为止尚没有发生中毒死亡事件，但其能够抑制蛋白磷酸酶的活力，致使蛋 白过磷酸化，是一类潜在的肿瘤促进因子，其长期毒性效应值得关注。PTXs不会 造成消费者急性中毒，能够引起肝损伤，在强碱条件下分子结构易被破坏。YTXs 对心肌细胞有毒害作用，对细胞磷酸二酯酶具有激活作用。 贝类的贝毒素污染不仪影响了消费者的健康，而且造成了我国贝类产品的出 ● 口受限，已受到有关贸易国的严重关注。本研究主要建立了贝类中腹泻性贝毒素 的液相色谱．串联质谱(HPLC．MS／MS)测试方法，并形成农业行业标准：测试了 黄海胶州湾海区贝类中腹泻性贝毒素的组成成分和含量水平；研究了该海区腹泻 性贝毒素的组成成分、含量水平和时I、日J动念变化规律；最后，进一步探讨了该海 区腹泻性贝毒素的产毒藻源。 贝类中腹泻性贝毒素的液相色谱．串联质谱测试方法的建立。以甲醇提取贝类 样品中的腹泻性贝毒素，提取液浓缩后经StrataIM．X固相萃取(SPE)柱净化处理， 处理液用HPLC．MS／MS测定。结果表明，OA和PTX．2的检测线性范围为1-300 ng／mL，检出限分别为3 gg／kg和2 lrtg／kg，定量限分别为10 p∥kg和6“∥kg。当添 加水平为10 gg／kg、50 gg／kg、160 gg／kg时，OA的方法回收率为79．40％～92．29％： ● 当添加水平为6 p．g／kg、30 i．tg／kg、160 gg／kg时，PTX-2的方法回收率为82．44％～100．4 ％。该检测方法可同时检测OA和PTX．2，具有较低的检出限和较高的准确度，可 满足我国对该类贝毒素的检测要求。 栉孔扇贝(Chlamysfa鹏，f)、紫贻贝(Mytilus edulis)、长牡蛎(Crassostrea gigas) 和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)样品中腹泻性贝毒素含量的测定。2009 年1月至6月分别在该海区采集上述贝类，检测发现，上述贝类中存在PTX．2， II 上海海洋人学硕十学位论文最高浓度为9．5 上海海洋人学硕十学位论文 最高浓度为9．5 gg／kg，最低在方法定量限(6 gg／kg)以下，最高浓度仅为我国法 定限量值(200 gg／kg)的5％；上述贝类中存在OA，但其含量较低，浓度在方法 定量限(10 I_,g／kg)以下。 黄海胶州湾海区腹泻性贝毒素的特征及其变化规律研究。运用主动吸附的方 法(Solid phase adsorption toxin tracking，SPATT)从海水中提取腹泻性贝毒素，然 后利用HPLC．MS／MS测定提取物中毒素的成分和含量。研究发现，在我国黄海胶 ● 州湾海区，存在软海绵酸(OA)和蛤毒素(PTX．2)，其浓度范围分别为0～3．874 ng／g和0．7653--22．89 ng／g。经检测分析，海水中蛤毒素含量在2009年6和7月份 已处于较高水平，自7月23同起丌始下降，7月3l R降至最低水平，后又出现波 动：从6月l 8同至7月23同海水中软海绵酸浓度处于较低的水平，7月3l同丌 始升高。研究海区海水温度与海水中毒素含量的相关性发现，当海水水温处于 19．2～21．5℃时，海水中PTX一2的含量较高，而OA的含量较低；当海水水温处于 21．5～26．3℃时，海水中PTX一2的含量降低，而OA的含量升高。该研究不仅全面 剖析了该海区贝类毒素的存在特征，同时也为制定合理的贝类收获期提供依据。 腹泻性贝毒素的